24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 939  |  回复: 12
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

billy5

铜虫 (著名写手)

[交流] 蛋白变性电泳(垂直电泳)求助!!!

近期一直跑SDS-PAGE电泳,按厂家所给的试剂盒(SDS-PAGE凝胶电泳试剂盒)。
   10%分离胶+5%浓缩胶--------用于跑人血蛋白的样品

   

   状况:接通电极电流后,样品一直无法往下跑?一直在浓缩胶中,最后弥散厉害,只好停掉!
   
   电泳缓冲液是新配的,胶拿出来时还是很有弹性的!

   1.是否蛋白上样缓冲液有问题导致?     2.是否是蛋白所带电荷不够?    3.电泳缓冲液有问题 ?    4.电泳槽的正负极有问题?


   望高手赐教!!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

服气不服输!!!!!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

billy5

铜虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by dreamsail at 2008-3-8 11:18:
提醒楼主下下
封口的琼脂糖要用缓冲液配.
我以前就是没注意用DDH2O配的,结果跑不动.
你电泳仪的电流显示正常吗?

多谢dreamsail的提醒!!!

电泳仪之前一直出现“电压偏低,电流偏高”的现象,后来通过调整电泳液的液面高低,电流显示可以回到以前的正常值!!
服气不服输!!!!!
9楼2008-03-08 12:05:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户

★ ★ ★ ★
reasonspare(金币+4,VIP+0):xiexie 欢迎常来,.兄弟很热心. 新虫鼓励奖2个
1 仔细检查是否电极接反,确认无误后检查电路是否畅通,预制胶要检查是否撕下密封胶带。
2 再次检查电泳槽内侧(凹型板一侧)是否漏液,是否内侧液面高于外侧,注意不要让两侧缓冲液联通。
3 蛋白样品是否与loading buffer混匀及加热变性?
4 电泳缓冲液按分子克隆上称量好配制即可,不用调PH值。
金币是赌出来的
2楼2008-03-05 17:06:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elvias

铁杆木虫 (正式写手)


reasonspare(金币+1,VIP+0):xiexie 欢迎常来,.谢谢交流
除了楼上的说得外
你的样品是否盐浓度过大~~
3楼2008-03-05 19:39:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

billy5

铜虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by wjswj at 2008-3-5 17:06:
1 仔细检查是否电极接反,确认无误后检查电路是否畅通,预制胶要检查是否撕下密封胶带。
2 再次检查电泳槽内侧(凹型板一侧)是否漏液,是否内侧液面高于外侧,注意不要让两侧缓冲液联通。
3 蛋白样品是否与loa ...

多谢指教!!  1-4都注意过了,依然出现问题:现在通过调整电泳液的液面高低,电压与电流值可以恢复正常,但是,样品依然停在浓缩胶中,还是不往下跑呀!!  
服气不服输!!!!!
4楼2008-03-07 20:57:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料科学与工程求调剂 +5 深V宿舍吧 2026-03-29 5/250 2026-03-29 19:10 by 学员8dgXkO
[考研] 275求调剂 +13 Micky11223 2026-03-25 18/900 2026-03-29 16:23 by 学员8dgXkO
[考研] 环境工程 085701,267求调剂 +6 minht 2026-03-29 6/300 2026-03-29 16:21 by 学员8dgXkO
[考研] 2026年华南师范大学欢迎化学,化工,生物,生医工等专业优秀学子加入! +3 llss0711 2026-03-28 6/300 2026-03-29 10:26 by llss0711
[考研] 调剂求院校招收 +6 鹤鲸鸽 2026-03-28 6/300 2026-03-29 08:15 by fmesaito
[考研] 329求调剂 +7 星野? 2026-03-26 7/350 2026-03-29 06:43 by 544594351
[考研] 食品工程专硕一志愿中海洋309求调剂 +4 小张zxy张 2026-03-26 8/400 2026-03-28 19:25 by lbsjt
[考研] 一志愿华理,数一英一285求A区调剂 +8 AZMK 2026-03-25 12/600 2026-03-28 18:15 by AZMK
[考研] 本科新能源科学与工程,一志愿华理能动285求调剂 +3 AZMK 2026-03-27 5/250 2026-03-28 16:19 by xxxsssccc
[考研] 312,生物学求调剂 +3 小译同学abc 2026-03-28 3/150 2026-03-28 15:32 by 落睿可思
[考研] 085701环境工程,267求调剂 +16 minht 2026-03-26 16/800 2026-03-28 12:16 by zllcz
[考研] 286求调剂 +12 PolarBear11 2026-03-26 12/600 2026-03-28 12:14 by zllcz
[考研] 材料277求调剂 +7 min3 2026-03-24 7/350 2026-03-28 11:39 by xuxiang
[考研] 339求调剂,想调回江苏 +6 烤麦芽 2026-03-27 8/400 2026-03-28 10:40 by 烤麦芽
[材料工程] 一志愿C9材料与化工专业总分300求调剂 +8 曼111 2026-03-24 9/450 2026-03-28 07:58 by YYYYX1234
[论文投稿] Journal of Mechanical Science and Technology +3 Russ_ss 2026-03-25 5/250 2026-03-27 10:49 by 陆小果画大饼
[考研] 359求调剂 +4 王了个楠 2026-03-25 4/200 2026-03-27 08:43 by 不吃魚的貓
[考研] 085602化学工程求调剂。 +4 平乐乐乐 2026-03-26 4/200 2026-03-26 17:57 by fmesaito
[考研] 材料与化工328分调剂 +6 。,。,。,。i 2026-03-23 6/300 2026-03-25 22:30 by 418490947
[考研] 336化工调剂 +4 王大坦1 2026-03-23 5/250 2026-03-23 18:32 by allen-yin
信息提示
请填处理意见