应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白变性电泳（垂直电泳）求助！！！
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
131/2返回列表12下一页
查看: 941  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

billy5

铜虫 (著名写手)

[交流] 蛋白变性电泳（垂直电泳）求助！！！

近期一直跑SDS-PAGE电泳，按厂家所给的试剂盒（SDS-PAGE凝胶电泳试剂盒）。
   10％分离胶+5%浓缩胶－－－－－－－－用于跑人血蛋白的样品

   

   状况：接通电极电流后，样品一直无法往下跑？一直在浓缩胶中，最后弥散厉害，只好停掉！
   
   电泳缓冲液是新配的，胶拿出来时还是很有弹性的！

   1.是否蛋白上样缓冲液有问题导致？     2.是否是蛋白所带电荷不够？    3.电泳缓冲液有问题 ？    4.电泳槽的正负极有问题？


   望高手赐教！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
服气不服输！！！！！
1楼 2008-03-05 16:38:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户
★ ★ ★ ★
reasonspare(金币+4,VIP+0):xiexie 欢迎常来,.兄弟很热心. 新虫鼓励奖2个
1 仔细检查是否电极接反，确认无误后检查电路是否畅通，预制胶要检查是否撕下密封胶带。
2 再次检查电泳槽内侧（凹型板一侧）是否漏液，是否内侧液面高于外侧，注意不要让两侧缓冲液联通。
3 蛋白样品是否与loading buffer混匀及加热变性？
4 电泳缓冲液按分子克隆上称量好配制即可，不用调PH值。
赞一下(10人) 回复此楼
金币是赌出来的
2楼2008-03-05 17:06:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elvias

铁杆木虫 (正式写手)
★
reasonspare(金币+1,VIP+0):xiexie 欢迎常来,.谢谢交流
除了楼上的说得外
你的样品是否盐浓度过大~~
赞一下(10人) 回复此楼
3楼2008-03-05 19:39:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

billy5

铜虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by wjswj at 2008-3-5 17:06:
1 仔细检查是否电极接反，确认无误后检查电路是否畅通，预制胶要检查是否撕下密封胶带。
2 再次检查电泳槽内侧（凹型板一侧）是否漏液，是否内侧液面高于外侧，注意不要让两侧缓冲液联通。
3 蛋白样品是否与loa ...

多谢指教！！  1－4都注意过了，依然出现问题：现在通过调整电泳液的液面高低，电压与电流值可以恢复正常，但是，样品依然停在浓缩胶中，还是不往下跑呀！！  
赞一下 回复此楼
服气不服输！！！！！
4楼2008-03-07 20:57:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

billy5

铜虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by elvias at 2008-3-5 19:39:
除了楼上的说得外
你的样品是否盐浓度过大~~

多谢指教！！   我跑的样品是稀释20倍的人血清样哦！！
赞一下 回复此楼
服气不服输！！！！！
5楼2008-03-07 20:59:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

billy5

铜虫 (著名写手)
reasonspare(金币+0,VIP+0):这个水肯定不行的,我们都是双蒸过的去离子水. 一定是去离子水.
还有一个，想问问大家！！

配胶过程所用的均为‘娃哈哈’牌的纯净水，会有什么影响吗？

[ Last edited by billy5 on 2008-3-7 at 21:01 ]
赞一下(10人) 回复此楼
服气不服输！！！！！
6楼2008-03-07 21:00:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

puma2003

铁杆木虫 (著名写手)
★
asr(金币+1,VIP+0)::P 多谢，欢迎常来交流！
引用回帖:
Originally posted by billy5 at 2008-3-7 21:00:
还有一个，想问问大家！！

配胶过程所用的均为‘娃哈哈’牌的纯净水，会有什么影响吗？

[ Last edited by billy5 on 2008-3-7 at 21:01 ]

只要是胶凝结了，就应该没有什么问题，不过你还是要换成双蒸水或是去离子水试试
赞一下(10人) 回复此楼
7楼2008-03-08 09:20:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dreamsail

银虫 (正式写手)
提醒楼主下下
封口的琼脂糖要用缓冲液配.
我以前就是没注意用DDH2O配的,结果跑不动.
你电泳仪的电流显示正常吗?
赞一下 回复此楼
8楼2008-03-08 11:18:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

billy5

铜虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by dreamsail at 2008-3-8 11:18:
提醒楼主下下
封口的琼脂糖要用缓冲液配.
我以前就是没注意用DDH2O配的,结果跑不动.
你电泳仪的电流显示正常吗?

多谢dreamsail的提醒！！！

电泳仪之前一直出现“电压偏低，电流偏高”的现象，后来通过调整电泳液的液面高低，电流显示可以回到以前的正常值！！
赞一下 回复此楼
服气不服输！！！！！
9楼2008-03-08 12:05:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户
你配胶的时候是不是用缓冲液配的啊？浓缩胶PH6.8吧，分离胶PH8.0，大概是这个。胶里有没有加SDS？如同琼脂糖电泳一样，要是胶里没有缓冲液也是不可以跑的。如果这些都对，那我实在想不出还有什么其他问题了。自来水配的胶都可以用，因为你的缓冲液是足够强的。
赞一下 回复此楼
金币是赌出来的
10楼2008-03-11 08:43:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 billy5 的主题更新
131/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085601材料工程找调剂 +14 oatmealR 2026-03-29 15/750 2026-03-29 21:48 by plmuchong
[考研] 311求调剂 +6 冬十三 2026-03-24 6/300 2026-03-29 20:45 by 无际的草原
[考研] 294分080500材料科学与工程求调剂 +8 柳溪边 2026-03-26 8/400 2026-03-29 20:42 by 唐沐儿
[考研] 297求调剂 +11 田洪有 2026-03-26 11/550 2026-03-29 13:14 by peike
[考研] 298求调剂 +4 种圣赐 2026-03-28 4/200 2026-03-29 08:42 by q1092522407
[考研] 本科双非材料，跨考一志愿华电085801电气，283求调剂，任何专业都可以 +6 芝士雪baoo 2026-03-28 8/400 2026-03-29 08:16 by 松花缸1201
[考研] 学硕274求调剂 +9 Li李鱼 2026-03-26 9/450 2026-03-28 21:42 by bymhappy
[考研] 食品工程专硕一志愿中海洋309求调剂 +4 小张zxy张 2026-03-26 8/400 2026-03-28 19:25 by lbsjt
[考研] 311（085601）求调剂 +4 liziyeyeye 2026-03-28 4/200 2026-03-28 18:50 by 535743368
[考研] 299求调剂 +7 嗯嗯嗯嗯2 2026-03-27 7/350 2026-03-28 13:09 by 唐沐儿
[考研] 070300求调剂306分 +4 26要上岸 2026-03-27 4/200 2026-03-28 13:06 by 唐沐儿
[考研] 085405 考的11408求各位老师带走 +3 Qiu学ing 2026-03-28 3/150 2026-03-28 09:19 by 乐呵呵的追梦人
[考研] 0703化学/290求调剂/本科经历丰富/工科也可 +9 丹青奶盖 2026-03-26 10/500 2026-03-28 07:45 by barnett0632
[考研] 086502化学工程342求调剂 +6 阿姨复古不过 2026-03-27 6/300 2026-03-28 07:06 by wangy0907
[考研] 086000调剂 +3 7901117076 2026-03-26 3/150 2026-03-27 21:34 by Jianing_Mi
[考研] 287求调剂 +10 land xuxu 2026-03-26 10/500 2026-03-27 15:33 by 帕尔马拉特
[考研] 材料求调剂 +5 .m.. 2026-03-25 5/250 2026-03-27 11:08 by 不吃魚的貓
[考研] 【2026考研调剂】制药工程 284分 求相关专业调剂名额 +4 袁奂奂 2026-03-25 8/400 2026-03-25 14:32 by lbsjt
[考研] 347求调剂 +4 L when 2026-03-25 4/200 2026-03-25 13:37 by cocolv
[考研] 269求调剂 +4 我想读研11 2026-03-23 4/200 2026-03-23 21:25 by pswait
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭