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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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billy5

铜虫 (著名写手)

[交流] 蛋白变性电泳(垂直电泳)求助!!!

近期一直跑SDS-PAGE电泳,按厂家所给的试剂盒(SDS-PAGE凝胶电泳试剂盒)。
   10%分离胶+5%浓缩胶--------用于跑人血蛋白的样品

   

   状况:接通电极电流后,样品一直无法往下跑?一直在浓缩胶中,最后弥散厉害,只好停掉!
   
   电泳缓冲液是新配的,胶拿出来时还是很有弹性的!

   1.是否蛋白上样缓冲液有问题导致?     2.是否是蛋白所带电荷不够?    3.电泳缓冲液有问题 ?    4.电泳槽的正负极有问题?


   望高手赐教!!
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服气不服输!!!!!
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

胶条啊

看来没拆掉胶条。
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
12楼2008-03-19 13:44:13
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wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户

★ ★ ★ ★
reasonspare(金币+4,VIP+0):xiexie 欢迎常来,.兄弟很热心. 新虫鼓励奖2个
1 仔细检查是否电极接反,确认无误后检查电路是否畅通,预制胶要检查是否撕下密封胶带。
2 再次检查电泳槽内侧(凹型板一侧)是否漏液,是否内侧液面高于外侧,注意不要让两侧缓冲液联通。
3 蛋白样品是否与loading buffer混匀及加热变性?
4 电泳缓冲液按分子克隆上称量好配制即可,不用调PH值。
金币是赌出来的
2楼2008-03-05 17:06:50
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elvias

铁杆木虫 (正式写手)


reasonspare(金币+1,VIP+0):xiexie 欢迎常来,.谢谢交流
除了楼上的说得外
你的样品是否盐浓度过大~~
3楼2008-03-05 19:39:16
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billy5

铜虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by wjswj at 2008-3-5 17:06:
1 仔细检查是否电极接反,确认无误后检查电路是否畅通,预制胶要检查是否撕下密封胶带。
2 再次检查电泳槽内侧(凹型板一侧)是否漏液,是否内侧液面高于外侧,注意不要让两侧缓冲液联通。
3 蛋白样品是否与loa ...

多谢指教!!  1-4都注意过了,依然出现问题:现在通过调整电泳液的液面高低,电压与电流值可以恢复正常,但是,样品依然停在浓缩胶中,还是不往下跑呀!!  
服气不服输!!!!!
4楼2008-03-07 20:57:00
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