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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 从质粒扩片段为什么扩不出来?
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bijiaoyingyang

金虫 (小有名气)

不要着急。

不要着急，做分子生物学就是这样子。
温度从38到44度,非特异性的条带很亮,很多这样的问题主要是引物特异性差。况且退火温度不高。你最好重新设计引物，确保退火温度，这点要首先保证。至于特异性，由于加上酶切位点的位点就受到了极大的限制，但是还是可以稍微变动的。比如引物可以在26---32个碱基之间，加适当个数的保护碱基等。
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11楼2008-03-11 11:03:17
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model031

银虫 (正式写手)
太感谢各位的建议了,我会从个方面着手考虑的.为了表示感谢,麻烦斑竹给以上每位金币一个,略表谢意.
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12楼2008-03-11 18:19:22
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model031

银虫 (正式写手)
我3.17号扩出来了我的目的片段,但最近用相同的程序和试剂却一直没扩出来,不知道什么原因,盼高手再指点下,昨天老板又开会了,他说我的很简单,就一PCR,言外之意,我的进展太慢了,可我一直不停的在做啊.所以搞的很郁闷,都不想去实验室了,一进去头就晕.
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13楼2008-03-28 10:27:09
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