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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 有没有人用过全式金公司的热启动Taq酶，那个算高保真酶么
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音四1990

铁虫 (小有名气)

[求助] 有没有人用过全式金公司的热启动Taq酶，那个算高保真酶么 已有1人参与

我又来向各位大神求救了……
话说我永远都在求救……

用了ROCHE的盒子做RACE发现里面居然没有酶！= =
手头只有一半的TAKARA Taq和Ex Taq，RACE用的热启动酶只有北京全式金公司的热启动Taq酶，这些貌似都不是高保真酶啊……
ROCHE反转出来的cDNA，按照说明书是用高保真酶做后续的PCR比较好，我如果用全式金这个酶会不会有影响？
用过的大神快出现！救急呀~

预感会看见某个熟悉的ID……
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我没那种命啊轮也不会轮到我
1楼 2014-04-15 22:28:24
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
音四1990: 金币+10, ★★★很有帮助, 哈哈哈哈哈哈哈哈哈果然是你啊哈哈哈哈哈哈 2014-04-15 23:28:40
我的第一轮PCR常用advantage2，第二轮用国产mix就好，循环数不要太多

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2楼2014-04-15 22:40:45
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音四1990

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-15 22:40:45
我的第一轮PCR常用advantage2，第二轮用国产mix就好，循环数不要太多

我打算用全式金那个酶做control反应试试……
之前做RACE用的是全式金那个酶 感觉还可以
第一轮老师给我的建议是41个循环 第二轮减少循环数 应该是这样么？如果非特异性产物特别多是不是第一轮循环数也可以降一点呢
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我没那种命啊轮也不会轮到我
3楼2014-04-15 23:30:59
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Neo2000

木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 音四1990 at 2014-04-15 23:30:59
我打算用全式金那个酶做control反应试试……
之前做RACE用的是全式金那个酶 感觉还可以
第一轮老师给我的建议是41个循环 第二轮减少循环数 应该是这样么？如果非特异性产物特别多是不是第一轮循环数也可以降一点 ...

第一轮的程序很重要，基因富集主要是在第一轮完成的

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4楼2014-04-16 06:10:50
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音四1990

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-16 06:10:50
第一轮的程序很重要，基因富集主要是在第一轮完成的
...

control PCR 第一轮跑完了，加样孔下面又拖……看来还是要用好的酶才行……
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我没那种命啊轮也不会轮到我
5楼2014-04-16 10:13:36
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aesar9983

新虫 (初入文坛)
Taq酶没有3’外切酶活力，当然不是高保真酶啦
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6楼2015-01-12 17:31:34
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫
热启动酶高保真酶。。解决
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todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
7楼2015-06-11 16:33:12
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吃瓜的半仙

新虫 (小有名气)
使用热启动酶就应该可以解决了，使用过的BIODAI热启动酶，反应体系中已含有终浓度为2mM的Mg2+，对于大多数PCR反应效果是可以的。
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8楼2019-02-20 10:02:23
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