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tanxintong

新虫 (初入文坛)

[求助] HPLC,流动相中加入乙酸铵峰面积降低,原因是什么? 已有3人参与

我做的是雌激素类的物质,雌二醇,雌三醇,雌酮,己稀雌酚。在流动相中加入10mmol的乙酸铵,为什么峰面积降低了20%左右,原因可能是什么?色谱柱是
waters altantis C18色谱柱。谢谢啦
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没什么想说的
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axearmy

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
乙酸铵在做雌激素的HPLC条件下是有吸收的,因此抬高了基线减小了峰面积。
我在做的时候由于仪器本身比较老,在使用流动相平衡时明显发现基线噪音要大一些,而且切换后基线要上升10多个mAU。

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4楼2014-04-15 18:31:13
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maxmahao

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你得看看你用的波长,醋酸铵是有吸收的,220左右吧

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-04-15 15:54:49
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
理论上应该是没有影响的,你可以看看是否加入乙酸盐之后出峰时间变化,两外加入乙酸盐改变pH值,使得分子可能有变化。
3楼2014-04-15 16:29:05
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tanxintong

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by axearmy at 2014-04-15 18:31:13
乙酸铵在做雌激素的HPLC条件下是有吸收的,因此抬高了基线减小了峰面积。
我在做的时候由于仪器本身比较老,在使用流动相平衡时明显发现基线噪音要大一些,而且切换后基线要上升10多个mAU。

谢谢你啊~帮助很大

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
没什么想说的
5楼2014-04-16 09:07:54
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