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279696866

银虫 (小有名气)

[求助] 细胞能在多聚甲醛里存放多久 已有5人参与

我要收集不同时间点的细胞,固定好后用于流式的荧光检测,前几个时间的细胞用多聚甲醛固定好后,是直接放在多聚甲醛里于4度保存,还是用多聚甲醛固定半小时后,放在PBS里面保存啊?
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18262639663

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
youlinglyw: 金币+2 2014-05-08 15:38:52
之前做共聚焦曾放过三天,没问题。是固定后染色的,因为共聚焦机器坏了只能放冰箱,三天后再测。应该固定好了就把多聚甲醛洗净。
老师说最多可以放一周,当然说的是我们的样,不过能不放最好是不放咯
2楼2014-04-16 12:35:38
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
youlinglyw: 金币+2 2014-05-08 15:39:00
时间长会影响抗体的标记能力
3楼2014-04-17 08:53:45
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liubin88321

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-04-17 08:53:45
时间长会影响抗体的标记能力

请问我是先固定再染色,还会用效果吗
4楼2014-05-04 15:32:53
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
4楼: Originally posted by liubin88321 at 2014-05-04 15:32:53
请问我是先固定再染色,还会用效果吗...

固定后洗掉,用PBS浸泡,可以4℃保存,只要不发霉就可以。
5楼2014-05-04 16:29:37
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279696866

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-05-04 16:29:37
固定后洗掉,用PBS浸泡,可以4℃保存,只要不发霉就可以。...

如果直接放在多聚甲醛里面呢,这样可以吗
6楼2014-05-04 16:43:48
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B.K.P.K.U

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

固定后就换PBS保存,放4度,只要不长菌,可以放很长段时间
7楼2014-05-06 11:28:00
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mutant

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
youlinglyw: 金币+2 2014-05-08 15:39:13
长期放在多聚甲醛里  或使的细胞表面抗原结合的更紧密,到时候修复不容易暴露吧
8楼2014-05-08 09:53:21
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laoyu

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

现代使用免疫细胞化学技术
1.        固定时间:一般以4%中性甲醛缓冲液等固定液固定2-24小时为宜,而B5固定液则一般为2-5小时,如果固定后不立即进行包埋和切片,可先将组织赞至于0.1%叠氮钠的缓冲液中。
9楼2016-12-27 14:50:56
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