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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 酿酒酵母载体PYES2/ct的诱导问题
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飘逸的云

新虫 (小有名气)

[求助] 酿酒酵母载体PYES2/ct的诱导问题 已有1人参与

请问有人用过PYES2/CT这个载体吗？本人连了一个基因在这个载体上，转进了宿主BY4742中，用半乳糖诱导了几次，一直诱导不出来。请问有没有成功构建过这套系统的大神啊，能否交流一下啊
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1楼 2014-04-14 15:45:36
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20081118129

新虫 (著名写手)

Drake
引用回帖:
2楼: Originally posted by jiaoxiayoulu at 2014-06-23 10:01:35
我也准备用这个载体做酵母基因过表达！现在也还是在查资料阶段：有个细节要注意，转化之后培养基中不能有葡萄糖哦，要用棉籽糖代替，培养至对数期初期之后才用半乳糖诱导表达的！【Overexpression of eIF4E in Sacc ...

你好，我也在这个载体上诱导蛋白表达，请问你诱导成功了吗？想和你交流，谢谢！
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3楼2016-11-12 15:48:11
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jiaoxiayoulu

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我也准备用这个载体做酵母基因过表达！现在也还是在查资料阶段：有个细节要注意，转化之后培养基中不能有葡萄糖哦，要用棉籽糖代替，培养至对数期初期之后才用半乳糖诱导表达的！【Overexpression of eIF4E in Saccharomyces cerevisiae Causes SlowGrowth and Decreased -Factor Response through Alterations in CLN3 Expression*】看看这篇文献吧
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2楼2014-06-23 10:01:35
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20081118129

新虫 (著名写手)

Drake
你好，请问你诱导出蛋白来了吗？我也正在做，想和你交流一下你，谢谢！
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4楼2016-11-12 15:49:10
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