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飘逸的云

新虫 (小有名气)

[求助] 酿酒酵母载体PYES2/ct的诱导问题 已有1人参与

请问有人用过PYES2/CT这个载体吗?本人连了一个基因在这个载体上,转进了宿主BY4742中,用半乳糖诱导了几次,一直诱导不出来。请问有没有成功构建过这套系统的大神啊,能否交流一下啊
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jiaoxiayoulu

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我也准备用这个载体做酵母基因过表达!现在也还是在查资料阶段:有个细节要注意,转化之后培养基中不能有葡萄糖哦,要用棉籽糖代替,培养至对数期初期之后才用半乳糖诱导表达的!【Overexpression of eIF4E in Saccharomyces cerevisiae Causes SlowGrowth and Decreased -Factor Response through Alterations in CLN3 Expression*】看看这篇文献吧
2楼2014-06-23 10:01:35
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20081118129

新虫 (著名写手)

Drake

引用回帖:
2楼: Originally posted by jiaoxiayoulu at 2014-06-23 10:01:35
我也准备用这个载体做酵母基因过表达!现在也还是在查资料阶段:有个细节要注意,转化之后培养基中不能有葡萄糖哦,要用棉籽糖代替,培养至对数期初期之后才用半乳糖诱导表达的!【Overexpression of eIF4E in Sacc ...

你好,我也在这个载体上诱导蛋白表达,请问你诱导成功了吗?想和你交流,谢谢!
3楼2016-11-12 15:48:11
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20081118129

新虫 (著名写手)

Drake

你好,请问你诱导出蛋白来了吗?我也正在做,想和你交流一下你,谢谢!
4楼2016-11-12 15:49:10
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