| 查看: 3270 | 回复: 13 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
蓝默儿金虫 (小有名气)
|
[求助]
腹水，辛酸-硫酸铵纯化 已有2人参与
|
|
|
腹水亚型是IgG1，纯化之前测其浓度为20毫克/毫升，纯化测其浓度为800微克/毫升，重复做了两次 具体步骤为： 1、 离心。12000rpm，5min，取上清于小烧杯中。 2、上清用0.45nm滤膜过滤。 3、加4倍体积PH4.5的醋酸缓冲液，边加边搅拌。 4、混合后，按每毫升稀释腹水加33ul的正辛酸，边加边搅拌。 5、室温搅拌30min，，取出12000rpm，离心30分钟，弃沉淀。 6、上清用0.45nm滤膜过滤，滤液调PH=7.4. 7、加入饱和硫酸铵至45%饱和度，搅拌30分，4°过夜或5小时以上。 8、4° ，12000rpm，离心30分钟弃上清保留沉淀， 9、10mMTris （PH=9.0）重悬沉淀，用透析卡进行透析过夜4°， 10、4°，12000rpm，5min取上清，定容，测下浓度。 别的实验室按次方法做没问题，就是第6步，我用滤膜过滤，他用滤纸过滤。不知为什么我的浓度好低  ，求高手指点 |
回复此楼» 猜你喜欢
恳请有学校收留
已经有6人回复
-
求调剂推荐
已经有8人回复
-
0854求调剂
已经有14人回复
-
300求调剂
已经有9人回复
-
291求调剂
已经有7人回复
-
289 分105500药学专硕求调剂(找B区学校)
已经有4人回复
-
初试324 中药学 一志愿天中医 求调剂
已经有3人回复
-
药学求调剂
已经有14人回复
-
327求调剂
已经有27人回复
-
急需调剂
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 可溶性蛋白透析后出现沉淀，是否可以用来做动物实验
已经有8人回复
- 量子点的透析纯化
已经有8人回复
- 蛋白质纯化中硫酸铵沉淀后沉淀溶解的问题
已经有11人回复
- 抗血清的纯化方法
已经有10人回复
- 分离纯化酶，硫酸铵沉淀后透析用什么样的透析袋
已经有5人回复
- 腹水纯化后 透析
已经有3人回复
- 【求助/交流】盐析法
已经有5人回复
wys476488620
金虫 (正式写手)
- BioEPI: 1
- 应助: 22 (小学生)
- 金币: 667.5
- 散金: 100
- 红花: 1
- 帖子: 487
- 在线: 81.7小时
- 虫号: 1785165
- 注册: 2012-04-28
- 性别: GG
- 专业: 兽医免疫学
7楼2014-04-14 14:06:26
蓝默儿
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1281.8
- 散金: 19
- 帖子: 80
- 在线: 88.4小时
- 虫号: 1695664
- 注册: 2012-03-16
- 性别: MM
- 专业: 兽医传染病学
2楼2014-04-14 10:12:52
wys476488620
金虫 (正式写手)
- BioEPI: 1
- 应助: 22 (小学生)
- 金币: 667.5
- 散金: 100
- 红花: 1
- 帖子: 487
- 在线: 81.7小时
- 虫号: 1785165
- 注册: 2012-04-28
- 性别: GG
- 专业: 兽医免疫学
3楼2014-04-14 12:37:56
蓝默儿
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1281.8
- 散金: 19
- 帖子: 80
- 在线: 88.4小时
- 虫号: 1695664
- 注册: 2012-03-16
- 性别: MM
- 专业: 兽医传染病学
4楼2014-04-14 13:21:58
