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明德2013

铁虫 (初入文坛)

[求助] miRNA提取 已有1人参与

各位高手，在提取植物miRNA荧光定量检测时，我先提取的总RNA，还需要经过PAGE电泳进行miRNA的分离纯化和富集吗？  求高手指点，谢谢！
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独有英雄驱虎豹，更无豪杰怕熊罴。
1楼 2014-04-11 14:32:22
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明德2013

铁虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by biostar2009 at 2014-04-12 21:14:38
我直接告诉你有点不负责任，因为stemloop法测miRNA，实话实说，还是专利项目，目前没有那篇文献大张旗鼓的介绍oligo的设计原理。现在坊间流传的，大多数都是参考stemloop法早期paper，虽然没有明说，但是提供了olig ...

太感谢您了，谢了
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独有英雄驱虎豹，更无豪杰怕熊罴。
8楼2014-04-14 21:38:41
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
明德2013(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-04-12 17:14:38
“在提取植物miRNA荧光定量检测时，我先提取的总RNA，还需要经过PAGE电泳进行miRNA的分离纯化和富集吗？”
你想干嘛？
克隆miRNA？
你要是就想做个taqman miRNA assay之类的，total RNA就可以了
去读你的产品说明书吧
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2014-04-11 14:45:33
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明德2013

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biostar2009 at 2014-04-11 14:45:33
“在提取植物miRNA荧光定量检测时，我先提取的总RNA，还需要经过PAGE电泳进行miRNA的分离纯化和富集吗？”
你想干嘛？
克隆miRNA？
你要是就想做个taqman miRNA assay之类的，total RNA就可以了
去读你的产品说 ...

您好 ，我是想提取miRNA，利用茎环引物逆转录后进行pcr扩增，提取总RNA后，利用总RNA就可以扩增出特定miRNA吗？
赞一下 回复此楼
独有英雄驱虎豹，更无豪杰怕熊罴。
3楼2014-04-12 11:59:00
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-04-13 18:25:04
引用回帖:
3楼: Originally posted by 明德2013 at 2014-04-12 11:59:00
您好 ，我是想提取miRNA，利用茎环引物逆转录后进行pcr扩增，提取总RNA后，利用总RNA就可以扩增出特定miRNA吗？...

是的，一般用Trizol就可以了，讲究么就去买个Ambion的kit，其实也差不多。我一直用Trizol，简单，快捷，便宜。
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4楼2014-04-12 12:45:00
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