应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » miRNA提取
81/1返回列表
查看: 1315  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

明德2013

铁虫 (初入文坛)

[求助] miRNA提取 已有1人参与

各位高手，在提取植物miRNA荧光定量检测时，我先提取的总RNA，还需要经过PAGE电泳进行miRNA的分离纯化和富集吗？  求高手指点，谢谢！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

分子生化实验经验积累 miRNA测序数据分析 分子生物学技术

» 猜你喜欢
独有英雄驱虎豹，更无豪杰怕熊罴。
1楼 2014-04-11 14:32:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有1个 )

biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
gyesang: 金币+5, 鼓励回帖交流！ 2014-04-13 18:25:53
gyesang: 回帖置顶 2014-04-13 18:25:54
我直接告诉你有点不负责任，因为stemloop法测miRNA，实话实说，还是专利项目，目前没有那篇文献大张旗鼓的介绍oligo的设计原理。现在坊间流传的，大多数都是参考stemloop法早期paper，虽然没有明说，但是提供了oligo sequence，然后自己总结出来的。
其实很有规律，看3-4个就能总结出来。
你去看这篇paper吧，ABI的miRNA assay，好像就发表过这一片scientific paper
Real-time quantification of microRNAs by
stem–loop RT–PCR
Caifu Chen*, Dana A. Ridzon, Adam J. Broomer, Zhaohui Zhou, Danny H. Lee,
Julie T. Nguyen, Maura Barbisin, Nan Lan Xu, Vikram R. Mahuvakar, Mark R. Andersen,
Kai Qin Lao, Kenneth J. Livak and Karl J. Guegler
Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, CA 94404, USA
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

明德2013
7楼2014-04-12 21:14:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
明德2013(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-04-12 17:14:38
“在提取植物miRNA荧光定量检测时，我先提取的总RNA，还需要经过PAGE电泳进行miRNA的分离纯化和富集吗？”
你想干嘛？
克隆miRNA？
你要是就想做个taqman miRNA assay之类的，total RNA就可以了
去读你的产品说明书吧
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2014-04-11 14:45:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

明德2013

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biostar2009 at 2014-04-11 14:45:33
“在提取植物miRNA荧光定量检测时，我先提取的总RNA，还需要经过PAGE电泳进行miRNA的分离纯化和富集吗？”
你想干嘛？
克隆miRNA？
你要是就想做个taqman miRNA assay之类的，total RNA就可以了
去读你的产品说 ...

您好 ，我是想提取miRNA，利用茎环引物逆转录后进行pcr扩增，提取总RNA后，利用总RNA就可以扩增出特定miRNA吗？
赞一下 回复此楼
独有英雄驱虎豹，更无豪杰怕熊罴。
3楼2014-04-12 11:59:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biostar2009

专家顾问 (正式写手)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-04-13 18:25:04
引用回帖:
3楼: Originally posted by 明德2013 at 2014-04-12 11:59:00
您好 ，我是想提取miRNA，利用茎环引物逆转录后进行pcr扩增，提取总RNA后，利用总RNA就可以扩增出特定miRNA吗？...

是的，一般用Trizol就可以了，讲究么就去买个Ambion的kit，其实也差不多。我一直用Trizol，简单，快捷，便宜。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2014-04-12 12:45:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

明德2013

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by biostar2009 at 2014-04-12 12:45:00
是的，一般用Trizol就可以了，讲究么就去买个Ambion的kit，其实也差不多。我一直用Trizol，简单，快捷，便宜。...

哦 ，太感谢了！这样就省事多了！
赞一下 回复此楼
独有英雄驱虎豹，更无豪杰怕熊罴。
5楼2014-04-12 20:28:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

明德2013

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 明德2013 at 2014-04-12 20:28:59
哦 ，太感谢了！这样就省事多了！...

差点忘了，miRNA通过茎环引物逆转录后，进行PCR的上游引物的游离碱基是怎么设计的？根据Tm 和GC含量 随便添加吗？麻烦您了!
赞一下 回复此楼
独有英雄驱虎豹，更无豪杰怕熊罴。
6楼2014-04-12 20:34:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

明德2013

铁虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by biostar2009 at 2014-04-12 21:14:38
我直接告诉你有点不负责任，因为stemloop法测miRNA，实话实说，还是专利项目，目前没有那篇文献大张旗鼓的介绍oligo的设计原理。现在坊间流传的，大多数都是参考stemloop法早期paper，虽然没有明说，但是提供了olig ...

太感谢您了，谢了
回复此楼
独有英雄驱虎豹，更无豪杰怕熊罴。
8楼2014-04-14 21:38:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 明德2013 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今天放榜吗？ +12 布布和一二 2026-08-19 12/600 2026-08-19 13:45 by gloomy6159
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +8 ziyangfang 2026-08-19 9/450 2026-08-19 13:08 by blacksandy
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +8 kkkl_v 2026-08-19 8/400 2026-08-19 12:34 by Vivilian
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +52 医学老男孩 2026-08-13 115/5750 2026-08-19 12:09 by 医学老男孩
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +10 基诺咪客 2026-08-17 14/700 2026-08-19 10:34 by 基诺咪客
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +8 启萌科技 2026-08-12 30/1500 2026-08-19 10:22 by 启萌科技
[基金申请] 快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低？主要原因有哪些？ +3 瞬息宇宙 2026-08-15 3/150 2026-08-18 21:40 by xiaohuixin
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +13 Ldrop2023 2026-08-13 16/800 2026-08-18 12:25 by 淀粉搬运工
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭