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明德2013铁虫 (初入文坛)
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miRNA提取 已有1人参与
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| 各位高手，在提取植物miRNA荧光定量检测时，我先提取的总RNA，还需要经过PAGE电泳进行miRNA的分离纯化和富集吗？ 求高手指点，谢谢！ |
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 分子生化实验经验积累 | miRNA测序数据分析 | 分子生物学技术 |
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【答案】应助回帖
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我直接告诉你有点不负责任，因为stemloop法测miRNA，实话实说，还是专利项目，目前没有那篇文献大张旗鼓的介绍oligo的设计原理。现在坊间流传的，大多数都是参考stemloop法早期paper，虽然没有明说，但是提供了oligo sequence，然后自己总结出来的。 其实很有规律，看3-4个就能总结出来。 你去看这篇paper吧，ABI的miRNA assay，好像就发表过这一片scientific paper Real-time quantification of microRNAs by stem–loop RT–PCR Caifu Chen*, Dana A. Ridzon, Adam J. Broomer, Zhaohui Zhou, Danny H. Lee, Julie T. Nguyen, Maura Barbisin, Nan Lan Xu, Vikram R. Mahuvakar, Mark R. Andersen, Kai Qin Lao, Kenneth J. Livak and Karl J. Guegler Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, CA 94404, USA |
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