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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 外源片段比载体大，构建时很诡异
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tu475575025

新虫 (小有名气)

[求助] 外源片段比载体大，构建时很诡异 已有5人参与

载体只有3k,我要连的片段有3.6k，用双酶切（一个粘性，个平端），第一次转化后一个子也没有长，想请教这种情况在连接时是否需要将载体骨架和片段的比例调整到片段比载体骨架多？
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1楼 2014-04-11 11:26:25
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不爱做实验

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

一般都是直接用ul 数的比例，这样最简便啊。。。
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14楼2014-04-16 20:08:51
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-04-11 14:36:39
外源肯定要比载体多，你用了个平末端的位点，这个是不长的原因

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2014-04-11 11:46:55
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tu475575025

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-11 11:46:55
外源肯定要比载体多，你用了个平末端的位点，这个是不长的原因

我已经用一个粘端加一个平端成功构过几个载体了，只是这次骨架较小，片段太大，不知道加大T4酶量或者用soulution I 效果是不是好点
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3楼2014-04-11 12:41:25
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tu475575025

新虫 (小有名气)
有做过小骨架连大片段的经验吗，来取点经
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4楼2014-04-11 12:42:25
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