| 查看: 1080 | 回复: 3 | ||
[求助]
B16F10黑素瘤细胞中的酪氨酸酶活性测定求助~~~！！！ 已有1人参与
|
|
各位虫友们好，本人在做药物对B16F10细胞内酪氨酸酶活性影响的实验，按照文献上的方法在96孔板中接一定量细胞，待细胞贴壁后倒去培养基，用PBS（PH=6.8）清洗两遍，后加1%的TritonX-10（PBS溶，PH=6.8）冻于-80℃ 1h后室温融化，37℃孵育10min，加入0.2%的L-Dopa 30 μl 37℃反应，文献里基本都是短则30min长则至多2h就能测出活力，可是我的2h内完全没有看到吸光度值的变化，由于实验条件有限，酶标仪不能控温，所以37℃反应基本在细胞培养箱中进行，但我觉得应该不是这个原因，不知道哪位大神做过这个实验，可否指点一二，到底是哪儿出了问题呢？？~~~！！！！急求答案，谢谢！！！！！！ 另外，文献里有的L-Dopa浓度可达1%，我这试了各种方法最多就只能溶到0.4%，不知是否有什么溶解多巴的好办法呢？？！！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
越来越担心硕士毕业后没有竞争力了
已经有14人回复
-
论文的挂名怎么评判贡献？基金申请中，排名第一的挂名文章
已经有3人回复
-
申博自荐 2篇一区TOP+1篇EI+2公开发明专利 2027博士申请
已经有3人回复
-
闲聊
已经有6人回复
-
申博求助
已经有4人回复
2楼2015-04-21 23:09:04
3楼2016-03-01 11:28:41
4楼2021-03-22 15:30:35