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wanglixia815

新虫 (正式写手)

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[求助] 已经快PCR折磨疯了。。救命呀已有11人参与

最近P出来的带总是很模糊。。。我的是要拿去的测序，第一次做，现在又有一个问题不懂。送去测序是送PCR products
还是需要什么切胶回收是什么意思？直接送PCR products 和为什么有的要切胶之回收之后再送啊。。有什么区别。。
请大神们解释一下。。

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有点矛盾。有点纠结

1楼 2014-04-09 20:07:33

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

d00614028

银虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wanglixia815(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-04-11 21:28:59

送PCR产物测序可能存在产物的不专一性导致会有杂峰，另外，你的上一个帖子里面的PCR产物也不是很好，建议优化PCR条件，特别是你的电泳条件哦，你上一个帖子里面纯粹是电泳没泡好。
另外，你的测序的目的是什么呢？如果是为了验证你的一个系统对于某个基因的修饰或者剪切（例如cas9系统的敲出结果的话），可以胶回收直接送测PCR产物，我曾经做过，效果还可以；如果你的PCR产物是要做克隆的话，建议还是先把产物克隆到简单的载体中，挑取单克隆送测，这样的话能保证结果的均一性。
最后，国内的测序公司测得很好的，为啥要送到韩国测序，华大和invitrogen的测序不是很好的么，送到国外测序？为啥？