24小时热门版块排行榜    

查看: 2185  |  回复: 3

guorongrong

铜虫 (正式写手)

[求助] 亚细胞定位 已有1人参与

最近想做某双子叶植物中两个基因的亚细胞定位,用软件预测一个是定位在细胞质膜上,另一个定位在细胞外,请问可以用融合GFP的方法进行亚细胞定位分析吗?如果可以的话,是转化拟南芥原生质体还是洋葱表皮?请各位前辈指点一下。谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Atalpha

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
guorongrong: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-04-07 22:26:47
定位在膜上的蛋白,其GFP要融合到该蛋白的胞内区段,且不影响功能为好,对于分泌型蛋白,似乎GFP检测不很成功,,因为胞外pH低,GFP经常不亮。

[ 发自小木虫客户端 ]

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2014-04-06 00:40:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guorongrong

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Atalpha at 2014-04-06 00:40:02
定位在膜上的蛋白,其GFP要融合到该蛋白的胞内区段,且不影响功能为好,对于分泌型蛋白,似乎GFP检测不很成功,,因为胞外pH低,GFP经常不亮。

做亚细胞定位的时候,不是必须要构建融合表达载体吗?请问要怎么把GFP融合到该蛋白的胞内区段?因为不知道该蛋白的胞内区段是在哪一段?
那胞外蛋白是不是没必要做亚细胞定位?之前没做过这部分的实验,所以大多都不懂,还请您多多指教。谢谢您的指导。
3楼2014-04-07 22:29:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guorongrong

铜虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by Atalpha at 2014-04-06 00:40:02
定位在膜上的蛋白,其GFP要融合到该蛋白的胞内区段,且不影响功能为好,对于分泌型蛋白,似乎GFP检测不很成功,,因为胞外pH低,GFP经常不亮。

你好,还请您多多指教一下。我看到论文里面是用FM4-64这个染料来染细胞膜,但是这个染料还挺贵的,有没有其他方法可以做亚细胞定位?
4楼2014-04-19 13:13:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 guorongrong 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[考研] 0856材料专硕353求调剂 +6 NIFFFfff 2026-03-20 6/300 2026-03-24 21:02 by hello七七
[考研] 07化学280分求调剂 +6 722865 2026-03-23 6/300 2026-03-24 20:58 by allen-yin
[考研] 一志愿华东理工大学081700,初试分数271 +5 kotoko_ik 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:29 by 学术搬砖er
[考研] 一志愿山东大学药学学硕求调剂 +3 开开心心没烦恼 2026-03-23 4/200 2026-03-24 00:06 by 开开心心没烦恼
[考研] 291求调剂 +8 hhhhxn.. 2026-03-23 8/400 2026-03-23 23:15 by peike
[考研] 材料专业求调剂 +11 hanamiko 2026-03-18 11/550 2026-03-23 23:12 by peike
[考研] 327求调剂 +5 prayer13 2026-03-23 5/250 2026-03-23 22:11 by 星空星月
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
[考研] 336化工调剂 +4 王大坦1 2026-03-23 5/250 2026-03-23 18:32 by allen-yin
[论文投稿] 急发核心期刊论文 +3 贤达问津 2026-03-23 5/250 2026-03-23 17:13 by 妹子不好惹
[考研] 293求调剂 +3 涛涛Wjt 2026-03-22 5/250 2026-03-22 22:21 by jiangpengfei
[考研] 315分,诚求调剂,材料与化工085600 +3 13756423260 2026-03-22 3/150 2026-03-22 20:11 by edmund7
[考研] 求调剂 +5 Zhangbod 2026-03-21 7/350 2026-03-22 13:13 by Zhangbod
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[考研] 299求调剂 +5 shxchem 2026-03-20 7/350 2026-03-21 17:09 by ColorlessPI
[考研] 324分 085600材料化工求调剂 +4 llllkkkhh 2026-03-18 4/200 2026-03-21 01:24 by JourneyLucky
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境专硕,总分308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:39 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 阿姐阿姐家啊 2026-03-18 3/150 2026-03-20 23:24 by JourneyLucky
[考研] 0856调剂,是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
信息提示
请填处理意见