24小时热门版块排行榜    

查看: 2184  |  回复: 3

guorongrong

铜虫 (正式写手)

[求助] 亚细胞定位 已有1人参与

最近想做某双子叶植物中两个基因的亚细胞定位,用软件预测一个是定位在细胞质膜上,另一个定位在细胞外,请问可以用融合GFP的方法进行亚细胞定位分析吗?如果可以的话,是转化拟南芥原生质体还是洋葱表皮?请各位前辈指点一下。谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Atalpha

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
guorongrong: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-04-07 22:26:47
定位在膜上的蛋白,其GFP要融合到该蛋白的胞内区段,且不影响功能为好,对于分泌型蛋白,似乎GFP检测不很成功,,因为胞外pH低,GFP经常不亮。

[ 发自小木虫客户端 ]

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2014-04-06 00:40:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guorongrong

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Atalpha at 2014-04-06 00:40:02
定位在膜上的蛋白,其GFP要融合到该蛋白的胞内区段,且不影响功能为好,对于分泌型蛋白,似乎GFP检测不很成功,,因为胞外pH低,GFP经常不亮。

做亚细胞定位的时候,不是必须要构建融合表达载体吗?请问要怎么把GFP融合到该蛋白的胞内区段?因为不知道该蛋白的胞内区段是在哪一段?
那胞外蛋白是不是没必要做亚细胞定位?之前没做过这部分的实验,所以大多都不懂,还请您多多指教。谢谢您的指导。
3楼2014-04-07 22:29:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guorongrong

铜虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by Atalpha at 2014-04-06 00:40:02
定位在膜上的蛋白,其GFP要融合到该蛋白的胞内区段,且不影响功能为好,对于分泌型蛋白,似乎GFP检测不很成功,,因为胞外pH低,GFP经常不亮。

你好,还请您多多指教一下。我看到论文里面是用FM4-64这个染料来染细胞膜,但是这个染料还挺贵的,有没有其他方法可以做亚细胞定位?
4楼2014-04-19 13:13:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 guorongrong 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[考研] 考研调剂 +4 呼呼?~+123456 2026-03-24 4/200 2026-03-24 23:16 by barlinike
[考研] 调剂 +4 13853210211 2026-03-24 4/200 2026-03-24 19:44 by ms629
[考研] 材料学硕333求调剂 +3 北道巷 2026-03-24 3/150 2026-03-24 19:17 by pswait
[考研] 277分求调剂,跨调材料 +3 考研调剂lxh 2026-03-24 3/150 2026-03-24 13:52 by JourneyLucky
[考研] 289求调剂 +7 怀瑾握瑜l 2026-03-20 7/350 2026-03-22 15:57 by ColorlessPI
[考研] 275求调剂 +6 shansx 2026-03-22 8/400 2026-03-22 15:27 by barlinike
[考研] 生物学调剂 +5 Surekei 2026-03-21 5/250 2026-03-22 14:39 by tcx007
[基金申请] 山东省面上项目限额评审 +4 石瑞0426 2026-03-19 4/200 2026-03-22 08:50 by Wei_ren
[考研] 一志愿华中科技大学071000,求调剂 +4 沿岸有贝壳6 2026-03-21 4/200 2026-03-22 07:21 by ilovexiaobin
[考研] 材料学硕301分求调剂 +7 Liyouyumairs 2026-03-21 7/350 2026-03-21 22:31 by peike
[考研] 一志愿深大,0703化学,总分302,求调剂 +4 七月-七七 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:20 by 学员8dgXkO
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 266求调剂 +3 哇呼哼呼哼 2026-03-20 3/150 2026-03-21 16:46 by barlinike
[基金申请] 学校已经提交到NSFC,还能修改吗? 40+4 babangida 2026-03-19 9/450 2026-03-21 16:12 by babangida
[考研] 330求调剂0854 +3 assdll 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:01 by 搏击518
[考研] 288求调剂 +16 于海海海海 2026-03-19 16/800 2026-03-20 22:28 by JourneyLucky
[考研] 086500 325 求调剂 +3 领带小熊 2026-03-19 3/150 2026-03-20 18:38 by 尽舜尧1
[考研] 0856调剂,是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂(0854都可以) +4 xbxudjdn 2026-03-18 4/200 2026-03-20 09:07 by 不168
信息提示
请填处理意见