应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 拓扑异构酶作用的超螺旋DNA
51/1返回列表
查看: 1698  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

暖心89

铜虫 (小有名气)

[求助] 拓扑异构酶作用的超螺旋DNA 已有1人参与

为什么现在查不到超螺旋pBR322DNA的厂家了？作为拓扑异构酶的底物进行琼脂糖凝胶电泳的话，可以用哪种DNA代替？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
佐助思密达。
1楼 2014-04-04 17:22:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

547star

木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 暖心89 at 2014-04-06 19:13:00
请问您说的这个是pBR322 vector，是带有pBR322DNA的质粒，我需要用pBR322DNA,做DNA松弛实验，是不是得从中提取出来啊？...

pBR322是一种质粒(plasmid)，本身就是经典的克隆载体（vector)，整个质粒pBR322 DNA。但现在这个质粒实际在分子克隆中不常使用了。如果10ug够用，可以不做转化大肠杆菌和质粒提取，不够用就提取一些。你要做DNA松弛实验，可以考虑其他容易获得的质粒超螺旋DNA，可以买个试剂盒回来提取一些，保证够用又省钱，有熟悉质粒提取的同学带着做提取就更好。严谨一点的话，找有超速离心机的实验室做一下超螺旋质粒DNA的分离，次一点的就用好点的试剂盒多提取几次，争取得一些超螺旋含量高的样品。
赞一下 回复此楼
为什么
4楼2014-04-06 23:17:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

547star

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
暖心89(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-05 15:46:03
暖心89: 金币+19, ★★★很有帮助, 谢谢 2014-04-05 19:44:13
promega 公司产品编号是D1511,479元，http://www.promega.com.cn/Produc ... amp;PostType=Detail 。不确定超螺旋的比例。用量大的话，可以咨询一些代制备质粒的公司看看会不会便宜一些。
赞一下 回复此楼
为什么
2楼2014-04-04 18:43:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

暖心89

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 547star at 2014-04-04 18:43:13
promega 公司产品编号是D1511,479元，http://www.promega.com.cn/Product.asp?Pro_ID=1271&PostType=Detail 。不确定超螺旋的比例。用量大的话，可以咨询一些代制备质粒的公司看看会不会便宜一些。

请问您说的这个是pBR322 vector，是带有pBR322DNA的质粒，我需要用pBR322DNA,做DNA松弛实验，是不是得从中提取出来啊？
赞一下 回复此楼
佐助思密达。
3楼2014-04-06 19:13:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

暖心89

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 547star at 2014-04-06 23:17:53
pBR322是一种质粒(plasmid)，本身就是经典的克隆载体（vector)，整个质粒pBR322 DNA。但现在这个质粒实际在分子克隆中不常使用了。如果10ug够用，可以不做转化大肠杆菌和质粒提取，不够用就提取一些。你要做DNA松弛 ...

通过转化大肠杆菌和质粒提取的目的是扩增DNA吗？您的意思是，如果PBR322质粒够用的话就不用扩增、可以直接用来做DNA松弛实验？因为pBR322质粒比较贵，我们实验室不是专门做生物的，所以提取质粒不太可能，那么如果用小牛胸腺DNA可以吗？在线等，很着急，麻烦您啦。。
赞一下 回复此楼
佐助思密达。
5楼2014-04-07 09:30:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +32 医学老男孩 2026-08-13 74/3700 2026-08-16 21:05 by 医学老男孩
[论文投稿] 岩土工程学报什么时候才能终审完呐 25+3 yeager111 2026-08-10 4/200 2026-08-16 20:42 by tfang
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +11 家与远方 2026-08-10 16/800 2026-08-16 10:28 by ray43
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] FileCode能看出啥？ +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭