应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教！熟悉“考马斯亮蓝测定蛋白质浓度”的虫子请进
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 663  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

gaona306

铜虫 (正式写手)

[交流] 请教！熟悉“考马斯亮蓝测定蛋白质浓度”的虫子请进

大家好，请教各位虫子一个问题：
　　文献报道，考马斯亮蓝G-250在游离状态下呈红色，最大光吸收在488nm；当它与蛋白质结合后变为青色，蛋白质-色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白质的定量测定。
　　但我按照文献配制的G－250（0.1mg/mL）是紫色的，用紫外光谱检测时超出量程，所以用二次水稀释一倍，检测其最大吸光度值，不在488nm，将其和一定浓度的牛血清白蛋白结合，发现其颜色并未变成青色，吸光度也不在595nm，而是随着蛋白浓度的增加红移。实验现象与文献完全不同，不知道是哪里出错了，请教各位！
　　很着急，请知情人解答疑惑，万分感谢！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2008-02-28 19:30:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

puma2003

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by gaona306 at 2008-3-1 13:44:


我仔细看了一下药品标签，我用的考马斯亮蓝是R－250，不是G-250，但同样都是考马斯亮蓝，不知道是不是这个的原因？R-250和R-250到底有什么区别呢？
还有就是我配制的考马斯亮蓝溶液放置几天之后，与蛋白质混 ...

R-250染胶使用，G-250也可染胶但是R-250不能用于蛋白浓度测定。出现沉淀应该是蛋白浓度过高所致
赞一下 回复此楼
10楼2008-03-03 08:40:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★
asr(金币+1,VIP+0)::P 多谢。
考马斯亮蓝G-250最大吸收波长465nm，跟蛋白结合后595nm。
赞一下(10人) 回复此楼
2楼2008-02-28 20:28:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhjcao

木虫 (小有名气)
★ ★ ★
asr(金币+2,VIP+0)::P 多谢，欢迎常来交流！
gaona306(金币+1,VIP+0):谢谢！
你的方法是怎么样的?
我找到一个标准方法:
取含10-100ug蛋白质溶液于小试管中,用双蒸水调体积到0.1mL,然后加入5mL蛋白试剂,充分振荡混合,2分钟后于595nm测定光吸收值.以双蒸水及5mL蛋白试剂用为空白对照。
赞一下(10人) 回复此楼
3楼2008-02-28 20:33:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaona306

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by zhjcao at 2008-2-28 20:33:
你的方法是怎么样的?
我找到一个标准方法:
取含10-100ug蛋白质溶液于小试管中,用双蒸水调体积到0.1mL,然后加入5mL蛋白试剂,充分振荡混合,2分钟后于595nm测定光吸收值.以双蒸水及5mL蛋白试剂用为空白对照。

我就是按照上述方法做的，考马斯亮蓝测定蛋白质浓度是个很经典的方法，已经写进大学实验课了，我觉得我的操作没有问题，可实验现象和标准方法差别很大，主要是加入蛋白质前后颜色均与文献不符，G－250与蛋白质结合之后的最大吸光度值也不在595nm,想不明白到底是哪里出问题了？
赞一下 回复此楼
4楼2008-02-29 09:08:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 307求调剂 +16 超级伊昂大王 2026-03-24 17/850 2026-03-30 17:15 by 544594351
[考研] 085600 295分求调剂 +4 W55j 2026-03-30 6/300 2026-03-30 17:13 by 五号电池5
[考研] 266分，求材料相关专业调剂 +4 哇呼哼呼哼 2026-03-30 4/200 2026-03-30 16:17 by wangjy2002
[考研] 262求调剂 +4 ZZ..000 2026-03-30 4/200 2026-03-30 15:57 by wangjy2002
[考研] 296求调剂 +10 彼岸t 2026-03-29 10/500 2026-03-30 10:50 by 探123
[考研] 329求调剂 +10 钮恩雪 2026-03-25 10/500 2026-03-29 13:32 by peike
[考研] 343求调剂 +6 爱羁绊 2026-03-29 6/300 2026-03-29 12:00 by 无际的草原
[考研] 356求调剂 +4 gysy?s?a 2026-03-28 4/200 2026-03-29 10:32 by 唐沐儿
[考研] 求调剂 +7 争取九点睡 2026-03-28 8/400 2026-03-28 21:07 by 争取九点睡
[考研] 315求调剂 +4 akie... 2026-03-28 5/250 2026-03-28 21:05 by zhq0425
[考研] 本科新能源科学与工程，一志愿华理能动285求调剂 +3 AZMK 2026-03-27 5/250 2026-03-28 16:19 by xxxsssccc
[考研] 286求调剂 +12 PolarBear11 2026-03-26 12/600 2026-03-28 12:14 by zllcz
[考研] 一志愿南京航空航天大学材料学硕求调剂 +3 @taotao 2026-03-28 3/150 2026-03-28 10:26 by JourneyLucky
[考研] 085602 307分 求调剂 +7 不知道叫什么！ 2026-03-26 7/350 2026-03-28 09:57 by 神马都不懂
[考研] 316求调剂 +5 Pigcasso 2026-03-24 5/250 2026-03-27 12:10 by zhshch
[考研] 324求调剂 +5 hanamiko 2026-03-26 5/250 2026-03-27 10:33 by wangjy2002
[考研] 0703化学求调剂 +3 丹青奶盖 2026-03-26 5/250 2026-03-26 20:11 by macy2011
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-26 3/150 2026-03-26 19:57 by nihaoar
[考研] 求b区院校调剂 +4 周56 2026-03-24 5/250 2026-03-25 17:12 by yishunmin
[考研] 344求调剂 +3 desto 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:09 by 搏击518
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭