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小雷想

铁虫 (正式写手)

[求助] hepg2细胞遇到了大麻烦,求帮助! 已有8人参与

3月18日买的hepg2细胞,以前没有养过,养了一段时间,开始两天还好,但越来细胞表现出死亡的迹象:不增殖,细胞内有很多小的圆圆的亮泡,开始不知道这些细胞内的亮泡是怎么回事,后来查好像说是细胞老化或培养基有问题,培养基:高糖DMEM+10%~12%FBS+1%双抗,培养基鉴定没有污染。可是这是肝癌细胞系呀,怎么会老化呢,癌细胞不是有无限的增殖能力吗,现在细胞快死了,求高手指点,最好是养过这个细胞的高手指点。附图几张:第一张,细胞刚运输来时的照片,其余的是从瓶里传出来及培养几天的图片。谢谢各位了,急呀!图片上红色圈的是圆圆的亮泡。

hepg2细胞遇到了大麻烦,求帮助!
刚买来.JPG


hepg2细胞遇到了大麻烦,求帮助!-1
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hepg2细胞遇到了大麻烦,求帮助!-2
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hepg2细胞遇到了大麻烦,求帮助!-3
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小雷想

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by pumaatlarge at 2014-04-08 20:17:26
楼主的细胞刚送来的时候胰酶消化的有点过,而且没有摇匀。所以部分细胞扎推生长,一些没有生长空间就分裂迟缓了,就是你说的明亮色浮起来的点。

一般这样细胞涨到80%,我们一般会胰酶短时间处理,,倒去,把生长 ...

不好意思,没有明白你的意思。第一张图就是细胞刚送来时还未做任何处理的图片,在路上已经运输了几天了。其实从第一张图上就能看到好多明亮色的点,但以前养细胞也很少,没有太多经验,所以不明白它们是什么,也没想到它们预示着什么不好的结果。之后我们自己动手养的时候细胞从来没有长到过80%,因为它根本就不增殖,后面这几张图是第一次从刚买来的瓶子里传出来的,一瓶传出了两瓶,也可能是调的密度大所以长的面积还不错,再之后传就再也没有长到30%。
9楼2014-04-09 15:57:49
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c_jade

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
没记错的话,hepg2应该是mem培养基,当然用dmem也没多大关系。送来的时候细胞状态就不好了。如果是跟正规的机构买的细胞,你可以叫他们再寄一瓶。我觉得可能是你传代的时候消化太久了
2楼2014-04-04 15:35:47
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叶心飞翔

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

是有白色的泡的,不是问题,第二张图片还可以,状态很好
3楼2014-04-07 20:32:49
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小雷想

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 叶心飞翔 at 2014-04-07 20:32:49
是有白色的泡的,不是问题,第二张图片还可以,状态很好

但为啥不增殖呢?最后死了。请问你养过吗?
4楼2014-04-08 16:40:52
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