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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » hepg2细胞遇到了大麻烦，求帮助！
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小雷想

铁虫 (正式写手)

[求助] hepg2细胞遇到了大麻烦，求帮助！ 已有8人参与

3月18日买的hepg2细胞，以前没有养过，养了一段时间，开始两天还好，但越来细胞表现出死亡的迹象：不增殖，细胞内有很多小的圆圆的亮泡，开始不知道这些细胞内的亮泡是怎么回事，后来查好像说是细胞老化或培养基有问题，培养基：高糖DMEM+10%~12%FBS+1%双抗，培养基鉴定没有污染。可是这是肝癌细胞系呀，怎么会老化呢，癌细胞不是有无限的增殖能力吗，现在细胞快死了，求高手指点，最好是养过这个细胞的高手指点。附图几张：第一张，细胞刚运输来时的照片，其余的是从瓶里传出来及培养几天的图片。谢谢各位了，急呀！图片上红色圈的是圆圆的亮泡。

hepg2细胞遇到了大麻烦，求帮助！
刚买来.JPG


hepg2细胞遇到了大麻烦，求帮助！-1
_3197857.JPG


hepg2细胞遇到了大麻烦，求帮助！-2
_3228021.JPG


hepg2细胞遇到了大麻烦，求帮助！-3
_3197854.JPG
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1楼 2014-04-03 12:38:31
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小雷想

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by pumaatlarge at 2014-04-08 20:17:26
楼主的细胞刚送来的时候胰酶消化的有点过，而且没有摇匀。所以部分细胞扎推生长，一些没有生长空间就分裂迟缓了，就是你说的明亮色浮起来的点。

一般这样细胞涨到80%，我们一般会胰酶短时间处理，，倒去，把生长 ...

不好意思，没有明白你的意思。第一张图就是细胞刚送来时还未做任何处理的图片，在路上已经运输了几天了。其实从第一张图上就能看到好多明亮色的点，但以前养细胞也很少，没有太多经验，所以不明白它们是什么，也没想到它们预示着什么不好的结果。之后我们自己动手养的时候细胞从来没有长到过80%，因为它根本就不增殖，后面这几张图是第一次从刚买来的瓶子里传出来的，一瓶传出了两瓶，也可能是调的密度大所以长的面积还不错，再之后传就再也没有长到30%。
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9楼2014-04-09 15:57:49
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c_jade

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
没记错的话，hepg2应该是mem培养基，当然用dmem也没多大关系。送来的时候细胞状态就不好了。如果是跟正规的机构买的细胞，你可以叫他们再寄一瓶。我觉得可能是你传代的时候消化太久了
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2楼2014-04-04 15:35:47
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叶心飞翔

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

是有白色的泡的，不是问题，第二张图片还可以，状态很好
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3楼2014-04-07 20:32:49
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小雷想

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 叶心飞翔 at 2014-04-07 20:32:49
是有白色的泡的，不是问题，第二张图片还可以，状态很好

但为啥不增殖呢？最后死了。请问你养过吗？
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4楼2014-04-08 16:40:52
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