应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 小试表达，中试不表达是什么原因
51/1返回列表
查看: 1202  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

cao534

银虫 (正式写手)

[求助] 小试表达，中试不表达是什么原因 已有3人参与

最近在做重组菌发酵，pet28a/BL21(DE3),氨苄抗性，摇瓶和10L发酵罐多次试验均有目的蛋白表达，但是做100L的时候发酵菌体收率比10L要高，但是菌体离心不实，也没有目的蛋白的表达，种子库使用的事甘油管，重组接摇瓶还是能表达，各位大侠知道是怎么回事吗？

[ Last edited by gyesang on 2014-4-3 at 11:55 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-04-03 11:38:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cao534

银虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 小花木兰 at 2014-06-05 16:37:41
怎解决呀，现在有什么问题呢

移种管路有1处死角，每次移种就会发生染菌，摇瓶做种子酒不会出现问题，但是最近不知怎么的，菌种张不起来，是新制备的感受态转化的菌体，接种后6-8h溶氧上升，菌体停止生长，种子检测过了没有我问题，培养基没有换过，离心收集少量的菌体，表达量也没有以前的高
赞一下 回复此楼
9楼2014-06-06 15:16:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

lotusx

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励新虫应助！ 2014-05-07 23:31:46
cao534: 金币+1, ★有帮助 2014-06-06 08:41:52
菌体离心不实 可能是菌体老化了，自溶出来的蛋白酶把目的蛋白降解了~
赞一下 回复此楼
2楼2014-04-03 17:55:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cao534

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lotusx at 2014-04-03 17:55:22
菌体离心不实 可能是菌体老化了，自溶出来的蛋白酶把目的蛋白降解了~

中间监控，诱导6h时也没有目的蛋白表达
赞一下 回复此楼
3楼2014-04-04 10:13:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wyz5527

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励新虫应助！ 2014-05-07 23:32:11
cao534: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-06-06 08:42:07
菌体离心不实我觉得不是老化自溶，反而是过快生长，况且发酵放大时，罐越大培养基浓度应当同比例适当降低，而不是同比例不变。再就是诱导剂添加时机、添加方式、添加量也影响比较大，毕竟诱导剂对菌来说是有毒性的
赞一下 回复此楼
简练才是真正的丰富
4楼2014-05-07 16:59:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085700资源与环境308求调剂 +6 墨墨漠 2026-03-18 6/300 2026-03-20 00:02 by 23Postgrad
[考研] 一志愿中国海洋大学，生物学，301分，求调剂 +5 1孙悟空 2026-03-17 6/300 2026-03-19 23:46 by zcl123
[考研] 296求调剂 +3 www_q 2026-03-18 6/300 2026-03-19 22:28 by zhq0425
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +5 枫桥ZL 2026-03-18 7/350 2026-03-19 14:52 by 功夫疯狂
[考研] 328求调剂，英语六级551，有科研经历 +4 生物工程调剂 2026-03-16 12/600 2026-03-19 11:10 by 生物工程调剂
[考研] 材料专硕英一数二306 +5 z1z2z3879 2026-03-18 5/250 2026-03-19 07:43 by BruceLiu320
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂（0854都可以） +3 xbxudjdn 2026-03-18 3/150 2026-03-18 22:14 by zhq0425
[考研] 330求调剂 +3 小材化本科 2026-03-18 3/150 2026-03-18 21:55 by 无懈可击111
[考研] 354求调剂 +4 Tyoumou 2026-03-18 7/350 2026-03-18 21:45 by Tyoumou
[考研] 26调剂/材料/英一数二/总分289/已过A区线 +7 步川酷紫123 2026-03-13 7/350 2026-03-18 17:12 by 尽舜尧1
[考研] 295求调剂 +3 一志愿京区211 2026-03-18 5/250 2026-03-18 17:03 by zhaoqian0518
[考研] 297求调剂 +8 戏精丹丹丹 2026-03-17 8/400 2026-03-18 14:30 by laoshidan
[考研] 070300化学319求调剂 +6 锦鲤0909 2026-03-17 6/300 2026-03-18 13:22 by Iveryant
[考研] 312求调剂 +8 陌宸希 2026-03-16 9/450 2026-03-18 12:39 by Linda Hu
[考研] 304求调剂 +12 小熊joy 2026-03-14 13/650 2026-03-18 12:34 by Linda Hu
[考研] 环境工程调剂 +8 大可digkids 2026-03-16 8/400 2026-03-18 09:36 by zhukairuo
[考研] 材料工程专硕274一志愿211求调剂 +6 薛云鹏 2026-03-15 6/300 2026-03-17 11:05 by 学员h26Tkc
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
[考研] 070303 总分349求调剂 +3 LJY9966 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:24 by xwxstudy
[考研] 304求调剂 +7 7712b 2026-03-13 7/350 2026-03-13 21:42 by peike
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭