应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 小试表达，中试不表达是什么原因
51/1返回列表
查看: 1201  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

cao534

银虫 (正式写手)

[求助] 小试表达，中试不表达是什么原因 已有3人参与

最近在做重组菌发酵，pet28a/BL21(DE3),氨苄抗性，摇瓶和10L发酵罐多次试验均有目的蛋白表达，但是做100L的时候发酵菌体收率比10L要高，但是菌体离心不实，也没有目的蛋白的表达，种子库使用的事甘油管，重组接摇瓶还是能表达，各位大侠知道是怎么回事吗？

[ Last edited by gyesang on 2014-4-3 at 11:55 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-04-03 11:38:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cao534

银虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 小花木兰 at 2014-06-05 16:37:41
怎解决呀，现在有什么问题呢

移种管路有1处死角，每次移种就会发生染菌，摇瓶做种子酒不会出现问题，但是最近不知怎么的，菌种张不起来，是新制备的感受态转化的菌体，接种后6-8h溶氧上升，菌体停止生长，种子检测过了没有我问题，培养基没有换过，离心收集少量的菌体，表达量也没有以前的高
赞一下 回复此楼
9楼2014-06-06 15:16:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

lotusx

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励新虫应助！ 2014-05-07 23:31:46
cao534: 金币+1, ★有帮助 2014-06-06 08:41:52
菌体离心不实 可能是菌体老化了，自溶出来的蛋白酶把目的蛋白降解了~
赞一下 回复此楼
2楼2014-04-03 17:55:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cao534

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lotusx at 2014-04-03 17:55:22
菌体离心不实 可能是菌体老化了，自溶出来的蛋白酶把目的蛋白降解了~

中间监控，诱导6h时也没有目的蛋白表达
赞一下 回复此楼
3楼2014-04-04 10:13:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wyz5527

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励新虫应助！ 2014-05-07 23:32:11
cao534: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-06-06 08:42:07
菌体离心不实我觉得不是老化自溶，反而是过快生长，况且发酵放大时，罐越大培养基浓度应当同比例适当降低，而不是同比例不变。再就是诱导剂添加时机、添加方式、添加量也影响比较大，毕竟诱导剂对菌来说是有毒性的
赞一下 回复此楼
简练才是真正的丰富
4楼2014-05-07 16:59:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600材料与化工 求调剂 +14 enenenhui 2026-03-13 15/750 2026-03-19 21:53 by allen-yin
[考研] 一志愿武汉理工材料工程专硕调剂 +5 Doleres 2026-03-19 5/250 2026-03-19 20:14 by 制度的
[考博] 东华理工大学化材专业26届硕士博士申请 +8 zlingli 2026-03-13 8/400 2026-03-19 16:32 by 轻松不少随
[考研] 能源材料化学课题组招收硕士研究生8-10名 +4 脱颖而出 2026-03-16 12/600 2026-03-19 16:17 by 脱颖而出
[考研] 085601材料工程专硕求调剂 +10 慕寒mio 2026-03-16 10/500 2026-03-19 15:26 by 丁丁*
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业（081702）315分求调剂 +11 yangfz 2026-03-17 11/550 2026-03-19 15:06 by houyaoxu
[考研] 304求调剂 +3 曼殊2266 2026-03-18 3/150 2026-03-19 14:42 by peike
[考研] 一志愿福大288有机化学，求调剂 +3 小木虫200408204 2026-03-18 3/150 2026-03-19 13:31 by houyaoxu
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂（0854都可以） +3 xbxudjdn 2026-03-18 3/150 2026-03-18 22:14 by zhq0425
[考研] 311求调剂 +11 冬十三 2026-03-15 12/600 2026-03-18 14:36 by 星空星月
[考研] 280求调剂 +6 咕噜晓晓 2026-03-18 7/350 2026-03-18 11:25 by 无际的草原
[考研] 303求调剂 +4 睿08 2026-03-17 6/300 2026-03-18 11:01 by Iveryant
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:12 by ruiyingmiao
[考研] 274求调剂 +5 时间点 2026-03-13 5/250 2026-03-17 07:34 by 热情沙漠
[考研] 一志愿211 0703方向310分求调剂 +3 努力奋斗112 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:44 by houyaoxu
[考研] 318求调剂 +3 Yanyali 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:41 by houyaoxu
[考研] 070303 总分349求调剂 +3 LJY9966 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:24 by xwxstudy
[考研] 289求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-14 6/300 2026-03-14 18:58 by userper
[考研] 297一志愿上交085600求调剂 +5 指尖八千里 2026-03-14 5/250 2026-03-14 17:26 by a不易
[考研] 招收0805（材料）调剂 +3 18595523086 2026-03-13 3/150 2026-03-14 00:33 by 123%、
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭