24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1255  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

cao534

银虫 (正式写手)

[求助] 小试表达,中试不表达是什么原因 已有3人参与

最近在做重组菌发酵,pet28a/BL21(DE3),氨苄抗性,摇瓶和10L发酵罐多次试验均有目的蛋白表达,但是做100L的时候发酵菌体收率比10L要高,但是菌体离心不实,也没有目的蛋白的表达,种子库使用的事甘油管,重组接摇瓶还是能表达,各位大侠知道是怎么回事吗?

[ Last edited by gyesang on 2014-4-3 at 11:55 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cao534

银虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by ganchao1776 at 2014-06-05 09:57:59
现在做的怎么样呀,pET28a是卡那抗性的。

现在问题解决了,不过新问题又来了
7楼2014-06-05 16:04:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

lotusx

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励新虫应助! 2014-05-07 23:31:46
cao534: 金币+1, 有帮助 2014-06-06 08:41:52
菌体离心不实 可能是菌体老化了,自溶出来的蛋白酶把目的蛋白降解了~
2楼2014-04-03 17:55:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cao534

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lotusx at 2014-04-03 17:55:22
菌体离心不实 可能是菌体老化了,自溶出来的蛋白酶把目的蛋白降解了~

中间监控,诱导6h时也没有目的蛋白表达
3楼2014-04-04 10:13:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wyz5527

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励新虫应助! 2014-05-07 23:32:11
cao534: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-06-06 08:42:07
菌体离心不实我觉得不是老化自溶,反而是过快生长,况且发酵放大时,罐越大培养基浓度应当同比例适当降低,而不是同比例不变。再就是诱导剂添加时机、添加方式、添加量也影响比较大,毕竟诱导剂对菌来说是有毒性的
简练才是真正的丰富
4楼2014-05-07 16:59:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 297工科调剂? +14 河南农业大学-能 2026-04-13 15/750 2026-04-15 13:25 by 黑科技矿业
[考研] 材料工程281还有调剂机会吗 +43 xaw. 2026-04-11 44/2200 2026-04-15 12:46 by 西北望—风沙
[考研] 327求调剂 +23 Xxjc1107. 2026-04-13 25/1250 2026-04-14 18:48 by 逍遥三郎
[考研] 药学305求调剂 +10 玛卡巴卡boom 2026-04-10 10/500 2026-04-14 15:55 by zs92450
[考研] 290求调剂 +21 luoziheng 2026-04-10 23/1150 2026-04-14 15:49 by zs92450
[考研] 求调剂 +20 MAX怅惘 2026-04-09 22/1100 2026-04-14 14:57 by 独醉梦孤城
[教师之家] 转长聘了 +7 简单化xn 2026-04-13 7/350 2026-04-14 14:50 by xindong
[考研] 300分求调剂 (085501机械专硕,本科扬大) +9 xu@841019 2026-04-11 10/500 2026-04-14 08:48 by 木木mumu~
[考研] B区0809 ,数一英一,290 求调剂 +3 泠潍1111 2026-04-12 4/200 2026-04-13 20:35 by 学员JpLReM
[考研] 267求调剂 +8 再忙也要吃饭啊 2026-04-09 8/400 2026-04-11 21:42 by cfdbai
[考研] 359求调剂 +5 胃痉挛累了 2026-04-11 5/250 2026-04-11 19:55 by lbsjt
[考研] 调剂求助 +6 果然有我 2026-04-11 7/350 2026-04-11 16:22 by 明月此时有
[考研] 22408 327分求调剂 +4 韵风kon 2026-04-10 4/200 2026-04-11 09:51 by 猪会飞
[考研] 一志愿东北大学控制工程085406数二英二385,求调剂 +8 Ezra_Zhang 2026-04-09 8/400 2026-04-11 09:15 by 猪会飞
[考研] 本科211 工科085400 280分求调剂 可跨专业 +11 LZH(等待调剂中 2026-04-10 11/550 2026-04-11 08:39 by zhq0425
[考研] 309求调剂 +14 wdhw 2026-04-10 15/750 2026-04-10 21:06 by zhouxiaoyu
[考研] 中科院总分315求调剂 +8 lallalh 2026-04-09 8/400 2026-04-10 19:30 by dick_runner
[考研] 求调剂 材料与工程 324分 专硕 +19 翩翩一书生 2026-04-10 21/1050 2026-04-10 11:41 by wp06
[考研] 材料专硕(0856) 339分求调剂 +9 哈哈哈鹅哈哈哈 2026-04-09 10/500 2026-04-09 20:01 by Orcid
[考研] 招收有机化学、化工,药学,食品灯专业学生 +3 yrfhjgdj 2026-04-08 3/150 2026-04-09 10:15 by QYQX_123
信息提示
请填处理意见