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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » loading buffer里的溴酚蓝和二甲苯箐，想去掉溴酚蓝，我该怎么办？
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夜流冰000
71楼2014-04-01 20:53:29
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lqshteacher
72楼2014-04-01 21:13:35
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userhung

禁虫 (文学泰斗)

木虫博士
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
帮顶，blessing, blessing, blessing ! ~~~
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73楼2014-04-01 22:08:52
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怎么都行

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这个估计没法分开吧
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74楼2014-04-01 22:16:28
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yingying1588
75楼2014-04-01 22:22:00
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梁永喜
76楼2014-04-01 22:49:07
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woke2008

新虫 (正式写手)
引用回帖:
65楼: Originally posted by biostar2009 at 2014-04-01 20:25:53
同志们加油，还有最后一点金币了
就没有一个人想到么？
晚上有空公布真相！

少加点就好了~
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忘记了该怎么忘记该怎么办！
77楼2014-04-02 10:01:03
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woolley

新虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
biostar2009: 金币+1, 感谢参与 2014-04-02 10:29:54
不知道是不是节日的特殊问题
首先，溴酚蓝只是用来指示用的，告诉你肉眼可见的位置，你在照相的时候用的是紫外线激发的荧光，溴酚蓝又不发光，不会档着你的小条带的。
其次，除非你要做切胶回收，溴酚蓝会使得溶胶之后的颜色变蓝，但是这个不需要担心，上柱子就没有了
最后，如果实在不想看到溴酚蓝，你就配点甘油或者蔗糖的无色的loading dye，上样的时候通过折射率来看样品。
当然，你如果有闲心，也可以更换电泳缓冲液和琼脂糖的浓度，那个也会影响到溴酚蓝的迁移率
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78楼2014-04-02 10:01:57
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)
引用回帖:
78楼: Originally posted by woolley at 2014-04-02 10:01:57
不知道是不是节日的特殊问题
首先，溴酚蓝只是用来指示用的，告诉你肉眼可见的位置，你在照相的时候用的是紫外线激发的荧光，溴酚蓝又不发光，不会档着你的小条带的。
其次，除非你要做切胶回收，溴酚蓝会使得溶胶 ...

首先，你确定溴酚蓝不会挡住条带？
比如你用3%的胶跑一个80-100bp的条带
或者用6% denaturing PAGE 跑一个25 bp左右的条带
然后，loading dye中还要给点EDTA的，不仅仅是加点甘油或者蔗糖增加密度，尤其是加到做过酶学反应的产物中。
最后，胶的浓度主要是根据要分离的片段大小决定的，如果这样迁就，太得不偿失了。
当然，感谢你有闲心参与，谢谢！
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79楼2014-04-02 10:29:35
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woolley

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
79楼: Originally posted by biostar2009 at 2014-04-02 10:29:35
首先，你确定溴酚蓝不会挡住条带？
比如你用3%的胶跑一个80-100bp的条带
或者用6% denaturing PAGE 跑一个25 bp左右的条带
然后，loading dye中还要给点EDTA的，不仅仅是加点甘油或者蔗糖增加密度，尤其是加到做 ...

发光原理不一样，肯定是看不到的
loading dye的说明书上有没有说我这个因为加了溴酚蓝，所以会遮挡小条带？
你可以用google的图片搜索，检索“DNA Gel”
你看看在紫外激发荧光的条件下能看到溴酚蓝吗？
如果有的话，发个链接过来，我也看看新鲜事
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80楼2014-04-02 11:06:11
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