应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助】PCR阴性对照出现条带？急！
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 724  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

shining-rose

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】PCR阴性对照出现条带？急！

求助各位老大，我昨天扩增细菌16 S ,23s , s  的时候阴性对照（不加模板）出现了明显的条带（加过模板的产物条带会更亮）,很奇怪，我又从新做了几遍，一一换了酶，buffer，水，就剩引物没换了。原因会在哪里呢？希望各位大虾指点一下。
     
      谢谢大家参与！！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2008-02-27 15:34:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

annwt

木虫 (正式写手)
★ ★
asr(金币+2,VIP+0)::P 多谢，欢迎常来交流！
我没有作过你的试验，我作过大量PCR的试验，我很感兴趣这方面的工作，我的分析是：
1，怀疑水的问题，换一瓶dd水，或其他试剂盒中带的水。
2，怀疑dNTP，buffer，没有办法换。
3，怀疑Taq酶，看其他同学作的结果中有你的带吗？
4，怀疑环境，细菌污染是常有的事，带上你的引物，换个实验室，甚至换操作人员。
遇到问题就是多作对照，比较，也许这样老板不高兴，但你要坚持，这才是学习。

[ Last edited by annwt on 2008-2-28 at 08:05 ]
赞一下(10人) 回复此楼
3楼2008-02-28 08:04:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

花枝俏

铜虫 (小有名气)
引物污染了，可能是长菌了。
赞一下 回复此楼
轻用其芒，动即有伤，是为凶器；深藏若拙，临机取决，是为利器。
2楼2008-02-28 00:03:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kindbillow

★ ★
asr(金币+2,VIP+0)::P 多谢。
二楼已经讲的很详尽了，我也认为是污染的问题，必须要注意实验操作时的无菌原则－－总之，一切按照实验手册严格执行，至于双蒸水、Taq酶、dNTP和buffer我的经验是，用自己新蒸或新购的，别为了省事、省钱耽误了大事
赞一下(10人) 回复此楼
4楼2008-02-28 08:37:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shining-rose

金虫 (小有名气)
reasonspare(金币+0,VIP+0):其实这个我经常遇到, 你只要将循环次数降到20-25,对照就没有了,就算最贵的酶 扩增16S 30-35 cycles 一样能扩对照
二楼和三楼分析的很对，谢谢你们

今天又做了，换了实验室，水，dNTP，酶，buffer。都换过了，还是有条带出现啊

也可能是Taq酶的问题，大家都知道Taq酶是从大肠杆菌纯化得来的，所以难免会有大肠杆菌基因组的残留，给公司打个电话，就说要做细菌16S扩增，问公司要超纯（也就是无基因组残留）的Taq酶

你们说呢？？
赞一下(10人) 回复此楼
5楼2008-02-28 20:42:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600材料与化工调剂 +4 kikiki7 2026-03-30 4/200 2026-03-30 06:46 by zhyzzh
[考研] 085601材料工程找调剂 +14 oatmealR 2026-03-29 15/750 2026-03-29 21:48 by plmuchong
[考研] 南京大学化学调剂 +9 景随风 2026-03-29 14/700 2026-03-29 21:22 by chixmc
[考研] 330分求调剂 +5 qzenlc 2026-03-29 5/250 2026-03-29 07:37 by 无际的草原
[考研] 数一英一271专硕（085401）求调剂，可跨 +7 前行必有光 2026-03-28 8/400 2026-03-28 23:22 by 小木虫tim
[考研] 学硕274求调剂 +9 Li李鱼 2026-03-26 9/450 2026-03-28 21:42 by bymhappy
[考研] 食品工程专硕一志愿中海洋309求调剂 +4 小张zxy张 2026-03-26 8/400 2026-03-28 19:25 by lbsjt
[考研] 0703一志愿9，初试成绩：338，四六级已过，有科研经历，求调剂！ +4 Zuhui0306 2026-03-25 4/200 2026-03-28 13:07 by 唐沐儿
[考研] 311求调剂 +9 lin0039 2026-03-26 9/450 2026-03-28 13:05 by 唐沐儿
[考研] 考研调剂 +4 Sanmu-124 2026-03-26 4/200 2026-03-27 17:49 by kiokin
[考博] 26申博 +3 加油冲啊！ 2026-03-26 3/150 2026-03-27 15:38 by cls512
[考研] 085601 材料工程 313分 求调剂 +5 Ong3 2026-03-27 5/250 2026-03-27 12:24 by goldfish51
[考研] 286求调剂 +4 lim0922 2026-03-26 4/200 2026-03-27 10:28 by guoweigw
[硕博家园] 北京林业大学硕导招生广告 +6 kongweilin 2026-03-26 8/400 2026-03-27 10:18 by FF_16
[考研] 321求调剂 +6 Ymlll 2026-03-24 6/300 2026-03-26 20:50 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿哈工大，085400，320，求调剂 +4 gdlf9999 2026-03-24 4/200 2026-03-25 23:01 by boxking200
[考研] 293求调剂 +7 加一一九 2026-03-24 7/350 2026-03-25 12:02 by userper
[考研] 318求调剂 +3 plum李子 2026-03-23 3/150 2026-03-25 09:42 by 雾散后相遇lc
[考研] 一志愿武理085500机械专业总分300求调剂 +3 an10101 2026-03-24 7/350 2026-03-25 00:00 by 山鬼0-
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境，总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭