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1990_feiyu

新虫 (初入文坛)

[交流] ChIP实验DNA超声破碎打不断怎么回事? 已有4人参与

如标题啊,我是做蓝藻的,找DNA-蛋白结合位点,可是DNA破碎一步就是做不出来,我是把100ml的菌液(OD730=0.6)回收做细胞破碎,离心上清用实验室的仪器做超声,可就是没反应,超与不超是一样的条带,但是把DNA纯化出来就能超碎,有没有谁知道是为什么呢,是不是我哪一步做错了,一个月了,我是新手,有相关经验的帮忙指点一下。
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feiyu_1990

新虫 (初入文坛)

★ ★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-05 19:08:18
引用回帖:
2楼: Originally posted by taojun at 2014-05-06 17:24:53
你往菌液里面加点SDS LYSIS BUFFER就可以了

我是先将细胞破碎完,离心取上清再超声的,前一阵往里加了融膜的Triton X-100,变成部分能超碎了,一部分在下面弥散的带,一部分还是在未超声DNA基因组那,这个是为什么呢?
4楼2014-07-04 20:19:46
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taojun

木虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-07-04 23:10:04
你往菌液里面加点SDS LYSIS BUFFER就可以了
2楼2014-05-06 17:24:53
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meng_xu

铜虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-05 19:08:06
可能是你的细胞结构的问题,要么选择裂解细胞,要么就选择增加超生破碎的次数,应该可以吧
3楼2014-05-07 03:47:11
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feiyu_1990

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by meng_xu at 2014-05-07 03:47:11
可能是你的细胞结构的问题,要么选择裂解细胞,要么就选择增加超生破碎的次数,应该可以吧

我是用机械破碎完细胞取上清超声的,现在只能部分超碎,不知道为什么啊
5楼2014-07-04 20:21:10
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