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caiqingchong木虫 (著名写手)
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我克隆的基因为什么总是不能表达?
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我克隆了三个酶,载体为pet28a,转化入E.coli Bl21中,在37°C、50/250ml三角瓶中诱导表达。分别用终浓度为)0.1 , 0.5和1毫摩的IPTG诱导4h,蛋白电泳,其中两个无特异带,重复过2次,均未出现特异带,但有一个有带,说明IPTG和E.coli Bl21没有问题。基因经过测序,正确。 我想知道,为什么基因不能表达,可以如何 处理才可能表达?谢谢! |
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