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关于生物正交的实验,荧光染料会不会直接进入细胞
最近看到一篇生物正交的文献,用叠氮化的糖孵育细胞,细胞膜表面的糖蛋白就用标记上叠氮,再用炔基修饰的荧光染料与之反应,就会对相应的糖蛋白进行标记。
有一个问题不明白:这些荧光染料大多数本身也会进入细胞,那么细胞内应该会有一些背景荧光啊,可是文献中的荧光分子只标记在膜上,他们是怎么把未参与反应的荧光分子去除的?难道用PBS洗细胞的时候会把多余的染料洗掉?求高手解答啊
附上文献A Cis-Membrane FRET-Based Method for Protein-Speci fic Imaging of Cell-Surface Glycans |
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