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hanbing7525

银虫 (小有名气)

[求助] 养的细胞被污染了已有3人参与

养的hepg2细胞被污染了,这是真菌污染吗?污染后怎么办?可能是哪些方面导致的污染?

养的细胞被污染了
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养的细胞被污染了-1
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养的细胞被污染了-2
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养的细胞被污染了-3
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养的细胞被污染了-4
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养的细胞被污染了-5
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yipan

铜虫 (职业作家)


【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
hanbing7525: 金币+5 2014-03-29 10:08:14
支原体污染。考虑使用支原体清除试剂盒。
2楼2014-03-27 16:33:48
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hanbing7525

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yipan at 2014-03-27 16:33:48
支原体污染。考虑使用支原体清除试剂盒。

支原体?怎么讲?
3楼2014-03-27 21:10:46
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我听五月天

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
培养液浑浊吗?我看着更像是死细胞呢~我也养过你这个细胞~你这些图看到的东西跟细胞在一个焦距下吗?
为爱而生
4楼2014-03-27 22:01:04
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wangyue115

木虫 (正式写手)

冰山火种

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
hanbing7525: 金币+5 2014-03-29 10:08:31
这是荧光下视野?明场还暗场?绿色的不是太好分辨。
你的培养基混浊吗?粘稠吗?有明显的絮状固体吗?
如果仅仅是快速的变黄,多半是支原体。可以考虑去支原体试剂盒。
如果混浊,就是细菌或污染。粘稠或有絮状固体多半是真菌污染。细菌和真菌污染基本上没有办法处理,只能放弃。
5楼2014-03-28 08:25:46
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yipan

铜虫 (职业作家)


引用回帖:
3楼: Originally posted by hanbing7525 at 2014-03-27 21:10:46
支原体?怎么讲?...

这个是个常见污染现象,如果细胞保持良好状态不被污染,也可以考虑在培养基中加入预防支原体污染试剂。
6楼2014-03-28 08:34:27
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hanbing7525

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 我听五月天 at 2014-03-27 22:01:04
培养液浑浊吗?我看着更像是死细胞呢~我也养过你这个细胞~你这些图看到的东西跟细胞在一个焦距下吗?

培养基不浑浊,但是细胞养着养着就死了,培养液里有漂着的黑点。是在一个焦距下的。
7楼2014-03-28 18:56:50
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hanbing7525

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by wangyue115 at 2014-03-28 08:25:46
这是荧光下视野?明场还暗场?绿色的不是太好分辨。
你的培养基混浊吗?粘稠吗?有明显的絮状固体吗?
如果仅仅是快速的变黄,多半是支原体。可以考虑去支原体试剂盒。
如果混浊,就是细菌或污染。粘稠或有絮状固 ...

刚开始是黑点,后来就是一团一团的东西,有的是长丝状。
8楼2014-03-28 18:59:05
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我听五月天

木虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by hanbing7525 at 2014-03-28 18:56:50
培养基不浑浊,但是细胞养着养着就死了,培养液里有漂着的黑点。是在一个焦距下的。...

支原体污染一般都有,只要细胞状态还可以就不会受支原体影响。建议你试一下培养液的PH,还有换液一天后细胞培养瓶里的液体PH。你的培养液加碳酸氢钠吗?加多少?
为爱而生
9楼2014-03-29 09:22:32
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wangyue115

木虫 (正式写手)

冰山火种

引用回帖:
8楼: Originally posted by hanbing7525 at 2014-03-28 18:59:05
刚开始是黑点,后来就是一团一团的东西,有的是长丝状。...

如果有长丝状了,估计就是霉菌或放线菌污染。
这类菌想去除难度极大,要用抗生素杀,并且剂量难以控制,高了伤细胞,低了杀不死。并且撤了抗生素后极易重新污染。
如果有备份或冻存的细胞,就是重新做吧。处理这些已经污染的细胞,太耗人力物力。

祝楼主实验顺利。
10楼2014-03-30 04:36:18
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