应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » PCR直接测序与克隆测序
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
151/2返回列表12下一页
查看: 1676  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

bao86

铁虫 (小有名气)

[交流] PCR直接测序与克隆测序

PCR直接测序与克隆后测序有什么区别
测出来的序列有什么差异么？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2008-02-24 20:53:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

Sanger882

银虫 (小有名气)
直接测序优点是：方便快捷，节省时间，避免了转化，克隆方面的繁琐步骤；
         缺点是：产物不稳定，送样还要附带冰盒，纯度要求高，回收纯化的产物需要达到一定的浓度才能测序，而且还要自己提供特异性引物，精确度也受一定影响；

  克隆测序的优点是：产物保存在菌体的质粒里面，稳定，可常温直接送菌液测序，无需提供特应性引物，而且测序的精确度较高；
    缺点是：步骤繁琐，包括制作高效的感受态细菌，连接，转化，克隆子阳性检测等，中间任何一个步骤都不能出现问题；
    在选择测序公司方面个人感觉：上海英骏公司PCR产物直接测序做的比较好。
赞一下(1人) 回复此楼
信念之火一旦燃烧，再大的暴风雨也无法阻挡！
14楼2008-05-18 11:07:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

weiwei1

木虫 (小有名气)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
直接测序需要你提供引物，而且引物序列是测不出来的。克隆后测序可以使用载体的通用引物，可以测出引物序列。
赞一下(10人) 回复此楼
2楼2008-02-25 09:53:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

booksworm

铜虫 (小有名气)
2楼的说得很正确
赞一下 回复此楼
3楼2008-02-25 10:59:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

njlf1258

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
另外再加一个克隆测序的优点CR测序往往会有杂峰出现,这是PCR产物不纯和PCR时出现突变引起,而克隆了理论上就不会出现以上情况了。
赞一下(10人) 回复此楼
4楼2008-02-25 14:30:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gp88888888

木虫 (正式写手)

赞一个.....

赞一个.....
回复此楼
5楼2008-02-25 15:15:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

葬花人

铜虫 (初入文坛)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):xiexie 欢迎常来,.
理论上PCR产物直接测序是很理想的——机器读数时由于正确的碱基占多数，PCR过程中产生的错误不足以影响某一碱基位点的正确阅读，而且免了克隆到大肠杆菌这一步工。
而克隆到大肠杆菌后，平板上的菌落都是单克隆子，也就是说PCR产生的错误克隆子也杂在其中。
但事实上克隆后再测序比直接测序成功率要高，究其原因，无非是胶上看着是一条带的，却经常是不同序列的混合物。
赞一下(10人) 回复此楼
花开易见落难寻
6楼2008-02-26 01:21:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

微微ing

金虫 (小有名气)
我觉得直接测序很方便，一般情况下结果也不错。
不过是不是准确度或者精度不高呢？会不会影响发表文章的档次呢？
赞一下 回复此楼
7楼2008-02-26 03:32:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangjun0457

银虫 (小有名气)
解释的挺好
回复此楼
8楼2008-02-26 12:43:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lwq54

铁虫 (小有名气)
高手们多发表些意见呀，
赞一下 回复此楼
9楼2008-04-22 21:41:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

piaopiaogg

铜虫 (初入文坛)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
有复杂结构的好象直接测序测不出来
赞一下(10人) 回复此楼
10楼2008-05-10 13:05:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 bao86 的主题更新
151/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 328求调剂 +7 嗯滴的基本都 2026-03-27 7/350 2026-03-28 04:19 by fmesaito
[考研] 085602 化工专硕 338分 求调剂 +10 路痴小琪 2026-03-27 10/500 2026-03-28 03:36 by fmesaito
[考研] 085602 307分 求调剂 +6 不知道叫什么！ 2026-03-26 6/300 2026-03-27 22:00 by 催化大白
[考研] 070300化学求调剂 +4 起个名咋这么难 2026-03-27 4/200 2026-03-27 21:39 by 83503孙老师
[考研] 求调剂 +4 零八# 2026-03-27 4/200 2026-03-27 18:07 by yu221
[考研] 266分求材料化工冶金矿业等专业的调剂 +4 哇呼哼呼哼 2026-03-26 4/200 2026-03-27 17:02 by zhyzzh
[考研] 0703一志愿9，初试成绩：338，四六级已过，有科研经历，求调剂！ +3 Zuhui0306 2026-03-25 3/150 2026-03-27 14:09 by shangxh
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工 264分各科过A区国家线 +10 哈哈157349 2026-03-21 10/500 2026-03-27 13:06 by zzll406
[考研] 0703化学338求调剂！ +6 Zuhui0306 2026-03-26 7/350 2026-03-27 10:35 by shangxh
[考研] 材料学硕，求调剂 6+5 糖葫芦888ll 2026-03-22 10/500 2026-03-27 08:18 by hypershenger
[考研] 340求调剂 +3 Amber00 2026-03-26 3/150 2026-03-26 18:57 by 不吃魚的貓
[考研] 309求调剂 +4 gajsj 2026-03-25 5/250 2026-03-26 00:27 by Dyhoer
[考研] 一志愿哈工大，085400，320，求调剂 +4 gdlf9999 2026-03-24 4/200 2026-03-25 23:01 by boxking200
[考研] 生物技术与工程 +3 1294608413 2026-03-25 4/200 2026-03-25 18:02 by 1294608413
[考研] 302求调剂 +4 锦衣卫藤椒 2026-03-25 4/200 2026-03-25 16:29 by 功夫疯狂
[考研] 347求调剂 +4 L when 2026-03-25 4/200 2026-03-25 13:37 by cocolv
[考研] 0854人工智能方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-24 4/200 2026-03-25 13:29 by 2177681040
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[考研] 求调剂 +5 Zhangbod 2026-03-21 7/350 2026-03-22 13:13 by Zhangbod
[考研] 求助 +5 梦里的无言 2026-03-21 6/300 2026-03-21 17:51 by 学员8dgXkO
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭