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huihui2255365金虫 (小有名气)
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[求助]
hplc转到uplc的洗脱问题 已有3人参与
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1是对照品，2是样品 根据HPLC的条件转化成UPLC条件得的，不知道怎样才能有效利用UPLC的快速呢？20分钟太长了，我试着把乙腈比例加大，但是基线不平稳不说，样品19 min那个峰洗不出来，全是杂峰，请高手指点  谢谢！！！HPLC的条件： 0~10 min 乙腈：0.2%磷酸 5:95 10~15 min 乙腈：0.2%磷酸12:88 15~50 min 乙腈：0.2%磷酸 12:88 UPLC条件： 0~5 min 乙腈：0.2%磷酸 5:95 5~10 min 乙腈：0.2%磷酸12:88 10~30 min 乙腈：0.2%磷酸12:88  1.jpg  2.jpg |
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huihui2255365
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我下午把条件改了 2 min 0.25 ml/min 乙腈：0.2磷酸=5:95 3 min 0.35 ml/min 乙腈：0.2磷酸=5:95 5 min 0.35 ml/min 乙腈：0.2磷酸=5:95 6 min 0.35 ml/min 乙腈：0.2磷酸=13:95 然后13分钟出完峰，乙腈的比例不敢再加大，由于梯度变化，样品在8min的时候基线还是不稳，明天再试试看甲醇做流动相好不好分 还有个问题，我很少用到0.35这个流速，这时候压力都到8000 psi了，不知道会不会上柱子？我洗柱子的时候以前都是0.2的流速，现在这个梯度的话洗柱子还继续0.2还是换到0.35才能洗的比较干净呢？谢谢啦  |
13楼2014-03-20 16:56:11
lifucheng
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2楼2014-03-19 13:00:51
炜少
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3楼2014-03-19 13:20:18
wyy080214
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4楼2014-03-19 13:47:11
