| 查看: 1598 | 回复: 3 | ||||
bio_weiyaya金虫 (正式写手)
|
[求助]
色谱柱平衡 已有2人参与
|
|
目前所在做的C18(4.6*250mm)HPLC分析中关于柱平衡有一些问题 基本情况：柱子保存在100%甲醇中，分析所用流动相为甲醇：水。每次柱平衡都是梯度平衡，即从100%甲醇过渡到分析所用比例，在此比例下直至基线平稳。 问题1：梯度平衡正确吗？0.5ml/min流速下，大概多长时间变换一下甲醇和水的比例，变换的幅度多大合适。 2：通常所说的15-20倍柱体积平衡柱子，是从基线平稳开始算起还是其他？ 3：做过几次实验，100%甲醇过渡到分析用比例大概有1h，基线平稳10min进样，样品保留时间5.9min，正常是7.6min。后又在极限平稳之后运行1h左右，保留时间变化至6.4min，若改成两小时仍然为6.4min。 基于以上试验情况，我分析是平衡方法不对，请大家给点意见，如果需要更多信息，我再给添上，还有金币。 |
回复此楼» 猜你喜欢
一志愿0817化学工程与技术，求调剂
已经有8人回复
-
271分求调剂学校
已经有3人回复
-
285求调剂
已经有4人回复
-
生物学308分求调剂（一志愿华东师大）
已经有7人回复
-
296材料专硕求调剂
已经有18人回复
-
材料与化工306分找调剂
已经有18人回复
-
302求调剂
已经有9人回复
-
一志愿北京科技大学材料工程085601，求调剂
已经有11人回复
-
283分材料与化工求调剂
已经有19人回复
-
326求调剂
已经有8人回复
lifucheng
专家顾问 (知名作家)
-
专家经验: +1438 - ACI: 6
- 应助: 1502 (讲师)
- 贵宾: 0.365
- 金币: 25507.1
- 散金: 27
- 红花: 133
- 帖子: 5708
- 在线: 730.1小时
- 虫号: 578772
- 注册: 2008-07-04
- 性别: GG
- 专业: 电化学分析
- 管辖: 分析
【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
费姚永芬: 金币+3, 辛苦了 2014-03-11 08:26:58
感谢参与，应助指数 +1
费姚永芬: 金币+3, 辛苦了 2014-03-11 08:26:58
|
1：梯度平衡无所谓正确与否，只是楼主这样做有点麻烦。楼主测样的方法是用梯度还是等度？因为楼主没有用盐，所以直接平衡。比如你是甲醇：水=60:40，你就直接用这个比例的流动相来平衡；如果是梯度，使用初试比例平衡； 2：通常所说的15-20倍柱体积平衡柱子并不绝对，只要基线平了就进样。比如甲醇：水=60:40冲基线，基线15分钟的波动在0.02还是0.2AU就可以进样了，不需要平衡那么久，而且甲醇-水还是比较容易平衡的。您用的是啥机子，如果是agilent或者waters甲醇-水冲20分钟就进样了，如果感觉不行，进标样前多进几针空白就可以了。 3：第三个有点没看懂 上个图中不？ |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
bio_weiyaya2楼2014-03-10 19:41:10
bio_weiyaya
金虫 (正式写手)
- 应助: 19 (小学生)
- 金币: 1013.3
- 散金: 413
- 红花: 2
- 帖子: 369
- 在线: 206.3小时
- 虫号: 2907435
- 注册: 2014-01-01
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
3楼2014-03-10 20:13:20
炜少
木虫 (正式写手)
- 应助: 211 (大学生)
- 金币: 1803.3
- 散金: 21
- 红花: 17
- 帖子: 610
- 在线: 75.1小时
- 虫号: 3003801
- 注册: 2014-02-28
- 性别: GG
- 专业: 合成药物化学
4楼2014-03-11 14:08:19
