为什么我每个条带底部都有一个细条带？ - 生物科学 - 蛋白电泳/WB

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RaIning.oO

铁杆木虫 (小有名气)

BioEPI: 1
应助: 1 (幼儿园)
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红花: 2
帖子: 76
在线: 58.7小时
虫号: 2262001
注册: 2013-01-26
性别: MM
专业: 生物技术药物

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
wizardfan: 金币+5, BioEPI+1, 鼓励做实验来论证观点的做法 2014-04-07 06:12:02

引用回帖:

18楼: Originally posted by huangyan0517 at 2014-03-28 16:30:41
溴酚蓝洗不掉吗？我一直以为溴酚蓝最后脱色时被洗掉了。
...

鉴于溴酚蓝洗不洗得掉的问题问了老师，据说是洗不掉的，理由：考马斯亮蓝染色液是跑完胶以后从外部结合到胶上的的，而溴酚蓝和蛋白是通过跑电泳进入胶内部的，因而洗脱液从外部洗脱先洗脱从胶外结合上的染料，然后再向内洗脱，条带颜色逐渐减弱，而你的胶不仅条带着色很深，且背景未去除完全，是不足以把溴酚蓝洗脱掉的。
另外，由于考虑到洗脱液是否会洗脱到胶内部的问题，以及从楼主的回复来看不打算做验证实验，因而自己又做了一个验证实验，将跑完的胶放在摇床上洗脱一周，最后发现蛋白条带及胶背景洗脱成透明色，而底部仍有蓝色细条带，重新染色后蛋白条带可见，因而推测洗脱液是不能洗脱由电泳跑入胶内的蛋白和溴酚蓝的。
因而证明细条带更有可能是溴酚蓝。