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huangyan0517

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时间在哪里，成就就在哪里

1楼 2014-03-10 15:47:22

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RaIning.oO

铁杆木虫 (小有名气)

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silicare: 应助指数+1 2014-03-28 13:52:33

引用回帖:

14楼: Originally posted by huangyan0517 at 2014-03-27 17:22:40
染之前就有，当然是考染。...

猜想是溴酚蓝，一方面，从条带看上的样品不完全一样，而细条带都存在，且位置宽度颜色相近，应该是加入同一物质并量也基本相同，排除人为故意干扰的可能，应该不是杂蛋白污染。其次所采用的染色方法是考染，应该是后染而染色前条带已经在了，而实际上除了MAKER以外，一般蛋白都是染色后观察的，而它有颜色，电泳之前加入的蓝色物质应该也就是溴酚蓝了。此外，溴酚蓝在电泳中起指示作用表现为蓝色，且分子量相对蛋白更小，所以通常跑在蛋白的下方以显示电泳的进度，而这块胶并没有跑完，细条带下方也没有其他条带，因而很有可能是指示剂。
建议：可以留一个空泳道，一个泳道只加loading buffer,一个加mark,加两三种不同样品，并对其中一个样品加不同浓度或量的loading buffer跑两张胶，一张跑一半，一张跑完，对比。如果跑一半的胶出现之前情况，而跑完的胶不出现；空泳道无细条带而其他都有；相同buffer量样品下细条带相同；不同buffer量样品下细条带不完全相同，则证明猜想正确。
本人才疏学浅，妄自猜想，不知分析正确与否，信息了解全面与否，如有疏漏还需海涵之处，还望各位大神指点。如有验证实验真有不符还请告知一起讨论。

[ 发自小木虫客户端 ]