| 查看: 2194 | 回复: 8 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
双酶切 已有3人参与
|
||
|
最近在做双酶切（TAKARA家的Xba1/Xho1 共用Buffer为10XM）,想重新构建真核表达载体（目的片段210bp+载体） 1、双酶切（20μl体系，1-3小时都试过），只能切开Xho1位点（与分步酶切对照过） 2、分步双酶切，第一步酶切，不管先切哪个位点，跑胶检测都能切开，但是到第二步酶切结束，想切胶回收的时候，却怎么也跑不出条带来了，只是模糊的一片，像拖带一样，我的DNA去哪儿了？愁死了，求高手指点迷津，感激不尽啊，跪谢！！！ 注：关于分步酶切胶回收损失的问题，我特意在第一步酶切结束后，尝试过三种方法 a、切胶回收（测得浓度为60ng左右） b、不跑胶，直接在原体系里进行第二步酶切 c、不跑胶，直接过柱回收（切胶回收试剂盒，不是专业的DNA分离柱） |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有67人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
6楼2014-03-10 08:32:13
lihe131
至尊木虫 (文坛精英)
- 应助: 106 (高中生)
- 金币: 12400.9
- 散金: 3690
- 红花: 10
- 帖子: 14218
- 在线: 263.6小时
- 虫号: 504554
- 注册: 2008-02-16
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
2楼2014-03-09 16:08:26
3楼2014-03-09 16:46:09
lvbobo823
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 363 (硕士)
- 金币: 7753.3
- 散金: 15
- 红花: 9
- 帖子: 751
- 在线: 189.4小时
- 虫号: 819723
- 注册: 2009-07-31
- 性别: GG
- 专业: 植物遗传学
4楼2014-03-09 21:34:20
10