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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 液相色谱出峰及柱压变化问题
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xing_dandan

木虫 (正式写手)

[求助] 液相色谱出峰及柱压变化问题 已有6人参与

安捷伦高效液相
色谱条件：流动相：甲醇：0.2%磷酸水（40: 60）；流速：1 mL/min； 检测波长：225 nm；柱温：35 ℃；进样体积：20 μL
以前相同条件下做的时候柱压一般会在190~220 bar之间，现在做了几次最初达到平衡的柱压都只有170 bar左右，更奇怪的是进完样品后柱压就开始下降，基线下移，2~3 min会出一个溶剂峰，再后面柱压降到120 bar左右不变，基线下移厉害，在负值处走平，样品峰一直不出现，这大概会是什么原因呢？
液相色谱出峰及柱压变化问题
图片1.png
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天道酬勤*_*
1楼 2014-03-06 10:04:02
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xing_dandan

木虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by wyy080214 at 2014-03-06 15:19:15
重现性好说明色谱柱、泵压、系统没有问题，最大可能在流动相或者样品溶剂上

样品溶剂主要是生理盐水和甲醇，自动进样时流动相是酸水相和甲醇相分别超声后，由四元泵带动按比例混合；手动进样时流动相是先按比例配好酸水相和甲醇相，然后超声上柱，谱图结果还算可以。可不可能是自动进样的比例阀出问题了？
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天道酬勤*_*
17楼2014-03-06 18:44:49
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jiafengtang

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xing_dandan: 金币+1, ★有帮助, 用的自动进样，如果液相比例阀没问题的话，流动相应该是没问题的，pH是3左右，进样前基线是走平的 2014-03-06 12:38:22
你这个流动相确定没问题吗（PH、浓度）？在进样前基线跑平了没有？
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2楼2014-03-06 11:59:44
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炜少

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xing_dandan: 金币+1, ★有帮助, 是自动进样，进样前是进了一针纯甲醇，后来选择洗针进样，每针进完都会自动清洗，但结果还是一样的 2014-03-06 12:40:23
自动进样的吧，进样针未清洗，灌注下进样针就行，确保进样针里是流动相。
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Whenthepainyoufeelsad,itisbesttolearnwhatthings.Learningwillmakeyouforeverremaininvincible.
3楼2014-03-06 12:08:13
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炜少

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
xing_dandan: 金币+1, ★有帮助 2014-03-06 13:26:03
xing_dandan: 金币+1 2014-03-06 14:23:44
你的样品是用流动相配制的吗，你这进样前后泵压变化太大，这个不正常啊，做别的样泵压变化大吗？？、
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Whenthepainyoufeelsad,itisbesttolearnwhatthings.Learningwillmakeyouforeverremaininvincible.
4楼2014-03-06 13:13:26
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