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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 怎样设计实验做细胞的增殖曲线
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我听五月天

木虫 (正式写手)

[求助] 怎样设计实验做细胞的增殖曲线已有2人参与

只有酶标仪，只有MTT，不能用电脑给细胞计数，怎样测细胞的增殖曲线？
PS:酶标仪测板子，不能带着板子的盖儿测吧？

[ Last edited by 我听五月天 on 2014-3-5 at 15:18 ]
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为爱而生
1楼2014-03-05 15:08:54
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western虫

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
我听五月天: 金币+3, ★有帮助, 那会不会很不准，毕竟每块板子铺的不一定很一致？ 2014-03-06 09:53:40
你要做多少个点儿的值你就铺多少块板，每次拿一块加MTT去测，测的时候要拿掉盖子的，所以一个板测，所有的孔都要暴露在外面。
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ForDream！
2楼2014-03-05 16:59:50
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ifyousee

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
我听五月天: 金币+5, ★★★很有帮助, 定点拍照计数需要什么特别的设备吗？酶标仪连接电脑就行？状态好的细胞MTT好像还是可以的~但是我一直养不好--哭。 2014-03-06 09:55:22
觉得酶标仪MTT不好用。
此外消化测细胞悬液密度也存在误差很大的问题
觉得最实在的还是定点拍照计数。当然，工作量妥妥的大
坚持用MTT的话你这得取好多个时间点的OD490或是595什么的，你懂的。MTT这货真的觉得略不靠谱
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3楼2014-03-06 00:24:16
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我听五月天

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ifyousee at 2014-03-06 00:24:16
觉得酶标仪MTT不好用。
此外消化测细胞悬液密度也存在误差很大的问题
觉得最实在的还是定点拍照计数。当然，工作量妥妥的大
坚持用MTT的话你这得取好多个时间点的OD490或是595什么的，你懂的。MTT这货真的觉得略 ...

定点拍照计数需要什么特别的设备吗？酶标仪连接电脑就行？状态好的细胞MTT好像还是可以的~但是我一直养不好--哭。
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为爱而生
4楼2014-03-06 14:45:54
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我听五月天

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by western虫 at 2014-03-05 16:59:50
你要做多少个点儿的值你就铺多少块板，每次拿一块加MTT去测，测的时候要拿掉盖子的，所以一个板测，所有的孔都要暴露在外面。

那会不会很不准，毕竟每块板子铺的不一定很一致？
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为爱而生
5楼2014-03-06 14:46:08
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ifyousee

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
我听五月天: 金币+3, ★有帮助 2014-03-06 19:10:25
silicare: 金币+2, 应助指数+1, 谢谢参与 2014-03-21 09:37:37
引用回帖:
4楼: Originally posted by 我听五月天 at 2014-03-06 14:45:54
定点拍照计数需要什么特别的设备吗？酶标仪连接电脑就行？状态好的细胞MTT好像还是可以的~但是我一直养不好--哭。...

这个是一个笨方法，但是我觉得可能是最真实的办法。
直接细胞拍照，对着照片数细胞数这个还是好办的吧，呵呵。
定点的话是在细胞瓶的固定位置拍照片，可以在平底做标记。我不确定这个是最效率的办法，但是我的确这么干的。
欧洲鳗鲡Anguilla anguilla尾鳍细胞系的建立以及不同生长因子对其增殖的影响
这个文章你可以稍微读一下，看一下
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6楼2014-03-06 17:15:49
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我听五月天

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by ifyousee at 2014-03-06 17:15:49
这个是一个笨方法，但是我觉得可能是最真实的办法。
直接细胞拍照，对着照片数细胞数这个还是好办的吧，呵呵。
定点的话是在细胞瓶的固定位置拍照片，可以在平底做标记。我不确定这个是最效率的办法，但是我的确 ...

谢谢
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为爱而生
7楼2014-03-13 10:28:23
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fightcricket

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
我听五月天: 金币+2 2014-03-20 08:50:38
silicare: 金币+1, 应助指数+1, 谢谢参与 2014-03-21 09:37:50
直接血球计数板数啊。最保险啊。能有几个样？如果不超过40个样不是太大的工作量。
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8楼2014-03-20 07:03:01
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我听五月天

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by fightcricket at 2014-03-20 07:03:01
直接血球计数板数啊。最保险啊。能有几个样？如果不超过40个样不是太大的工作量。

您好，血球计数板怎么数？我要测增殖曲线，难道要用培养瓶培养加药的细胞，然后消化下来计数？那样如果有凋亡的细胞怎么算呢？
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为爱而生
9楼2014-03-20 08:50:32
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fightcricket

金虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 我听五月天 at 2014-03-20 08:50:32
您好，血球计数板怎么数？我要测增殖曲线，难道要用培养瓶培养加药的细胞，然后消化下来计数？那样如果有凋亡的细胞怎么算呢？...

我弄悬浮细胞，不过我想可以消化下来数，别离心就行。凋亡？MTT也不能测凋亡的。可以用trypan blue标记坏死细胞和晚期凋亡细胞。
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10楼2014-03-20 14:41:04
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