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w7363387

铜虫 (初入文坛)

[求助] 求助细胞培养液的区别已有7人参与

最近在做细胞毒性试验标准要求用MEM培养液,但我手头只有RPMI 1640培养液,请问我可以用RPMI 1640培养液替代吗?
我养的细胞是鼠成纤维细胞,采用MTT染色法试验。
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跳跳鱼

木虫 (著名写手)

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感谢参与,应助指数 +1
看看文献有用1640的吗    否则容易出问题。1640是一种合成培养基    MEM是一种低糖培养基
快乐奋斗,创造所有。
2楼2014-03-05 15:48:45
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western虫

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一般情况下我们都与细胞来源使用的培养基一致,不排除手头没有的时候会用其他培养基做下预实验,可能养不起来。养起来,形态可能也会变。所以你最好搞点MEM,实在不行,传一点到1640里看看能不能养
ForDream!
3楼2014-03-05 16:56:17
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yipan

铜虫 (职业作家)


【答案】应助回帖

成纤维细胞的原代培养可用酶消化法或组织块法,其中组织块法又因其操作简便、条件易于控制而应用更为普遍。通常,以酶消化法获得的成纤维细胞悬液在接种后5~10min即可见细胞以伪足初期附着,与底物形成一些接触点;然后细胞逐渐呈放射状伸展,胞体的中心部分亦随之变扁平;最快者大约在接种后30min,细胞贴附底物即较为完全,呈现成纤维细胞的形态。采用组织块法则大约在接种后2~3天到1周左右,在接种的皮肤组织块周围长出细胞。待细胞融合成片,铺满培养容器底壁大部分时即可进行传代。一般都采用胰蛋白酶(trypsin),将成纤维细胞从底壁消化下来后分瓶作传代培养。成纤维细胞在体外培养条件下能保持良好的分裂增殖能力。细胞分裂时变为球形;分裂后又平铺在附着物的表面成为有突起的扁平细胞。体外培养的成纤维细胞,其生命期限与物种等因素有关。
4楼2014-03-10 11:03:39
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

MEM养贴壁细胞,1640养悬浮细胞。用1640也可以。
5楼2014-03-11 15:53:05
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w7363387

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-03-11 15:53:05
MEM养贴壁细胞,1640养悬浮细胞。用1640也可以。

但我看标准上写的养贴壁细胞用的是1640   求解!!!
6楼2014-03-12 08:18:17
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孟安格

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

要求你用什么你就用什么,1640确实是养贴壁细胞的

[ 发自小木虫客户端 ]
7楼2014-03-12 08:52:01
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by w7363387 at 2014-03-12 08:18:17
但我看标准上写的养贴壁细胞用的是1640   求解!!!...

悬浮细胞jurkat、THP-1、U937、杂交瘤细胞等都是用1640养;
贴壁细胞成纤维细胞、内皮细胞、胶质瘤细胞等都是用MEM养。
8楼2014-03-12 09:09:17
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李谋志

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


w7363387(youlinglyw代发): 金币+1 2014-03-12 21:59:06
个人建议不要用MTT,CCK-8效果更好,国外好的期刊都不怎么接收MTT做出来的实验结果!另外还是最好用MEM培养液。。。。
9楼2014-03-12 14:07:40
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我听五月天

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我觉得吧,不要用营养低的培养液代替营养高的就行~
为爱而生
10楼2014-03-15 11:28:12
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