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fanger

银虫 (小有名气)

[交流] 肿瘤干细胞微球体 已有7人参与

本人养的肿瘤干细胞微球体的长势很好,传了好几代了,形态也好,随着代数的增加球越来越紧,越来越圆,可是检测干细胞标志物的百分比却很低,与普通癌细胞无差异。细胞接种的密度也不大,5000个/孔(6孔板),理论上说粘连成球的很少,而且已经传了三代以上。实在是不能理解,特担心是不是标志物抗体失效了还是什么情况?但之前有一种标志物检测有5.8%的样子,现在检测的也没有了。求同样养微球体的大虾一起来交流啊!
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做好自己!
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fanger

银虫 (小有名气)

送红花一朵
太感谢您了!
做好自己!
2楼2014-03-03 16:06:59
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一抹

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不知道你是用的什么标记物
Inner Peace
3楼2014-03-03 17:02:52
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
肿瘤球内不全是肿瘤干 有个文献,你找来看看
Self-Renewal Does Not Predict Tumor Growth Potential in Mouse Models of High-Grade Glioma
我的路靠我的脚踩出来!!!不走寻常路!!!
4楼2014-03-03 20:31:52
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fanger

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by telomerase at 2014-03-03 20:31:52
肿瘤球内不全是肿瘤干 有个文献,你找来看看
Self-Renewal Does Not Predict Tumor Growth Potential in Mouse Models of High-Grade Glioma

这个知道,但是标志物与普通培养的癌细胞的比例肯定不同啊,应该有些区别,曾经有人检测单阳性达到20%,而我最近做的只有1%左右,都怀疑是抗体有问题了。球传代越多不是应该阳性率越高吗?或者是因为我测的是双阳性, 有一个抗体是有问题了没测出来,这个在划分区域的时候有人为因素,可能检测的与直接检测单阳性结果有差异?我用的是CD133和CD90
做好自己!
5楼2014-03-04 09:52:39
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fanger

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 一抹 at 2014-03-03 17:02:52
不知道你是用的什么标记物

CD90,CD133
做好自己!
6楼2014-03-04 10:05:02
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
单阳有可能纯度不够,像白血病要好几个maker
肿瘤好像还有作cd44 cd54的,当然这要看是什么肿瘤组织了
有一个抗体是有问题了没测出来,这个在划分区域的时候有人为因素,可能检测的与直接检测单阳性结果有差异?
这个要看你选的抗体的克隆号,如果选对了,画门没问题的话(就是阴阳的话,别搞什么hing  low  m),应该不会涉及人为因素的
我的路靠我的脚踩出来!!!不走寻常路!!!
7楼2014-03-04 23:00:39
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fanger

银虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by telomerase at 2014-03-04 23:00:39
单阳有可能纯度不够,像白血病要好几个maker
肿瘤好像还有作cd44 cd54的,当然这要看是什么肿瘤组织了
有一个抗体是有问题了没测出来,这个在划分区域的时候有人为因素,可能检测的与直接检测单阳性结果有差异?
...

谢谢,这个以前没有做过,没有人带,基础薄弱,很多不懂。正在摸索 。
做好自己!
8楼2014-03-10 17:00:30
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金石为开66

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
贴主 请问你们是怎么样的 ?          能否留下联系方式交流一下啊?       为什么我养的细胞第二天老是聚成团呢?
9楼2014-08-11 16:35:26
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随风飘散_微

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
您好,LZ,我现在也正在做无血清培养肿瘤干细胞成球,细胞大约48h就可成70微米的球了,可是球不圆,多数成葡萄状,我传第二、三代也差不多,就是二、三代比一代球的比例增加。请问你说的传代后球越来越紧、越来越圆,是什么细胞啊?另外你在做干细胞免疫荧光(一抗标记PE\FITC)流式检测的时候,你怎么分组的呢?
10楼2014-10-23 16:04:54
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