24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

米老鼠的树

银虫 (小有名气)

应助: 3 (幼儿园)
金币: 56.6
散金: 397
红花: 4
帖子: 259
在线: 106.4小时
虫号: 1658448
注册: 2012-03-02
性别: MM
专业: 生物材料

[求助] FAM-miRNA转染小鼠骨髓间充质干细胞观察不到荧光已有3人参与

本人用FAM-miRNA转染mMSCs，转染试剂是用的Invitrogen公司的lipo2000，转染步骤也是按照说明书做的。lipo2000和miRNA孵育的过程用的是不含血清的完全培养基而不是优化培养基，但这个影响不大吧？也说可以用不含血清的完全培养基的对吧~接种的细胞的密度是4万/孔（24孔板）。孵育了4~5个小时，用荧光显微镜观察，看不到荧光，但是背底的荧光很强。FAM-miRNA是用的公司合成的，应该没问题。想请教一下各位，问题出在哪儿了？再有，想请教一下大家干细胞转染与其他细胞转染的一些区别，因为看资料干细胞转染要比其他细胞类型难一些对吧？谢谢各位啦~~

回复此楼

» 猜你喜欢

最近几年招的学生写论文不引自己组发的文章已经有11人回复
写了一篇“相变储能技术在冷库中应用”的论文，论文内容以实验为主，投什么期刊合适？已经有4人回复
需要合成515-64-0，50g，能接单的留言已经有3人回复
中科院杭州医学所招收博士生一名（生物分析化学、药物递送）已经有3人回复
临港实验室与上科大联培博士招生1名已经有8人回复
想换工作。大多数高校都是评职称时认可5年内在原单位取得的成果吗？已经有4人回复
带资进组求博导收留已经有9人回复

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

从原代开始培养的骨髓间充质干细胞会不会随着培养时间的延长而开始分化？已经有14人回复

peace

1楼 2014-02-25 11:10:20

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

米老鼠的树

银虫 (小有名气)

应助: 3 (幼儿园)
金币: 56.6
散金: 397
红花: 4
帖子: 259
在线: 106.4小时
虫号: 1658448
注册: 2012-03-02
性别: MM
专业: 生物材料

引用回帖:

2楼: Originally posted by ifyousee at 2014-02-25 12:56:35
建议先试下一般的荧光载体转染实验。这样可以熟悉下显微镜操作、转染流程等等的。
另外我一般是转染24h以后再看细胞荧光的。有些细胞系是比较难转染或是难表达外源基因的，这个也是必须承认的

谢谢。我也试过24h的，也是观察不到荧光。