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lsl729125741

金虫 (初入文坛)

[求助] 小弟实验多次都没得到M13K07的噬菌斑 已有1人参与

以下是我的具体方法,哪位高手给指教指教,万分感谢~!!!
其中方法一和二都没长出噬菌斑,而方法三却有噬菌斑出现。
哪位高手给指教指教,万分感谢~!!!



方法一:
1. 取新到的M13K07原液100μL作105、106、107、108、109、1010、1011、1012倍稀释。
取不同稀释度的M13K07 100μL与100μLTG1菌液混合,37℃孵育30min,之后与4mL 0.5% Top Agar混匀,倾注于2×YT(+5mM MgCl2)平板,凝固后置于37℃恒温培养。
2. 空白平板上层倾注4mL含有100μL TG1菌液的0.5% Top Agar,作为对照组。

方法二:
取新到的M13K07原液划线于2×YT(+5mM MgCl2)平板,向上层分别倾注含有100μL、300μL TG1菌液的4mL 0.5% Top Agar,凝固后置于37℃恒温培养。
小弟实验多次都没得到M13K07的噬菌斑

方法三:
吸取M13K07滴于2×YT(+5mM MgCl2)平板上,晾干后,将混有100μL过夜培养的TG1菌液的4mL 5% Top Agar(+5mM MgCl2)倾注于上层,凝固后置于37℃恒温培养。
小弟实验多次都没得到M13K07的噬菌斑-1
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橙子婷婷

新虫 (初入文坛)

7楼2020-03-03 17:53:32
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haofeng0804

木虫 (著名写手)

同问,我最近也遇到类似问题
3楼2014-07-05 10:45:59
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super飞天娃

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

M13K07在含有IPTG/Xgal的培养基上能长出蓝斑吗?
4楼2014-09-07 09:49:50
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砰砰响

新虫 (初入文坛)

前辈,请问您做出来了吗?我现在也在做这种实验,只看到一个个密密麻麻小菌落,没有噬菌斑那。方法如下:1. 取新到的M13K07原液10000倍稀释。取M13K07 10μL与200μLTG1菌液混合,37℃孵育5h,之后与4mL 0.5% Top Agar混匀,倾注于2×YT(无抗性)平板,凝固后置于37℃恒温培养。
5楼2017-06-25 12:19:01
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