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ice清玉

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8楼: Originally posted by 三蛰 at 2014-02-20 16:43:54
很可能是点样问题。

应该不是...

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11楼2014-02-20 19:31:13

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朱小坏

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

或者是样留在孔里没跑出去，或者胶太厚，缓冲液用久了，太热了。。。

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12楼2014-02-20 19:34:52

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小套套李

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3楼: Originally posted by ice清玉 at 2014-02-20 13:52:36
我们实验室称量多少琼脂糖，加多少染料都写得清清楚楚贴在墙上的...TAT...一开始我也觉得是我配胶的问题，可是marker都很清晰啊...我也觉着诡异啊...难道就这样碰运气才能碰上哪次有条带我才能回收吗...太悲催了吧 ...

你们实验室琼脂糖和染料加多少呢？

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13楼2014-02-20 21:05:03

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西门吹雪170

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【答案】应助回帖

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10楼: Originally posted by ice清玉 at 2014-02-20 19:30:06
5ul 啊...降解也不可能全降解啊...有一次P完后接着跑电泳没有带，在冰箱放了两天后又跑了一次竟然出带了......

1、点样有问题，可以在点样前混匀一下
2、胶没问题的话，请确定你染色也没有问题
3、一般PCR产物都是全点，因为有的条带是很弱的，量不足看不出结果

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植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良

14楼2014-02-20 21:40:39

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建议你跑完PCR离心后再点样

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我从远方来，没带走一丝遗憾

15楼2014-02-21 14:30:11

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RNAPROTEIN

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【答案】应助回帖

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ice清玉(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-02-23 23:53:47

有可能是放冰箱之后酶继续催化PCR 反应，如果是你PCR反应的循环次数不够的话，那么P完之后很可能因为copy数少而不能用肉眼看到条带，放冰箱一段时间之后酶可能会继续催化反应（反应应该很慢，但由于PCR是成指数增长，所以哪怕是增加了2-3个反应，你的产物的copy数都会成指数增加），导致你再次跑胶时能看到条带。这纯属个人设想，仅供参考。

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16楼2014-02-22 14:09:19

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