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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 求助，买细胞需要买配套培养基吗
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落落_无尘

金虫 (初入文坛)

[求助] 求助，买细胞需要买配套培养基吗

想请教一下有经验的虫友，在ATCC买细胞需要买配套的培养基和血清吗？上面卖的和平时实验室用的不一样，难道以后都得买ATCC的吗？
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1楼 2014-02-17 14:01:19
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玻璃微球

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
落落_无尘: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-02-17 14:14:52
ATCC的细胞买来好贵啊，我们这儿虽有些也是ATCC的，但用的是自己配的培养基，买来粉末的培养基自己配，用时加上十分之一胎牛血清，还有双抗。
细胞一般都长得不错。建议LZ先保一批，分出几盘用自己配的培养基养养看看状态再说~
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2楼2014-02-17 14:06:32
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落落_无尘

金虫 (初入文坛)
内容已删除
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3楼2014-02-17 14:14:39
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lywinan

捐助贵宾 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
落落_无尘: 金币+15, ★★★很有帮助 2014-02-17 14:45:44
寄来的细胞应该是一个方瓶，细胞贴壁，里面灌满培养基的状态，LZ可以在无菌条件下将里面的大部分培养基转移出来保存，留一小部分（一般培养用的量）将瓶放入二氧化碳培养箱让细胞恢复一下，而后用寄送用的培养基添加DMSO冻存原始株，冻存过程中留一小部分细胞在方瓶或孔板中继续传代培养，可以参照ATCC的说明使用培养基，自己准备的培养基里面开始添加一些寄送用的培养基混合使用，而后根据细胞生长状况逐渐减少原始培养基的使用比例，其实，个人认为，MEM、DMEM、DMEM/F12或1640等培养基基本可以满足大部分细胞的初期生长，关键是添加血清，初期可以使用好的胎牛血清，发狠添加15%-20%，还有长不好的么？还长不好，就要怀疑染菌或支原体喽。。。祝你好运！
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4楼2014-02-17 14:34:23
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落落_无尘

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lywinan at 2014-02-17 14:34:23
寄来的细胞应该是一个方瓶，细胞贴壁，里面灌满培养基的状态，LZ可以在无菌条件下将里面的大部分培养基转移出来保存，留一小部分（一般培养用的量）将瓶放入二氧化碳培养箱让细胞恢复一下，而后用寄送用的培养基添加 ...

好像是干冰包裹的冻存管，不然路途那么远细胞会不会都长满脱落了？
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5楼2014-02-17 14:46:48
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lywinan

捐助贵宾 (职业作家)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 落落_无尘 at 2014-02-17 14:46:48
好像是干冰包裹的冻存管，不然路途那么远细胞会不会都长满脱落了？...

如果时间久了，确实会长满脱落的~~如果是冻存管，那就复苏、扩增后再部分冻存部分培养，个人经验，没有额外添加物要求的话，一般的商业培养基添加10%-15%的胎牛血清，一般的细胞都养得可欢实了~~~
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6楼2014-02-17 15:03:38
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落落_无尘

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by lywinan at 2014-02-17 15:03:38
如果时间久了，确实会长满脱落的~~如果是冻存管，那就复苏、扩增后再部分冻存部分培养，个人经验，没有额外添加物要求的话，一般的商业培养基添加10%-15%的胎牛血清，一般的细胞都养得可欢实了~~~...

我们用的是hyclone的培养基和血清，貌似说是给gbico的更好用一些？
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7楼2014-02-17 15:08:22
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lywinan

捐助贵宾 (职业作家)
★ ★
wizardfan: 金币+2, 谢谢参与 2014-02-18 09:35:25
引用回帖:
7楼: Originally posted by 落落_无尘 at 2014-02-17 15:08:22
我们用的是hyclone的培养基和血清，貌似说是给gbico的更好用一些？...

是的，但是现在ThermoFisher已经将LifeTechnologies收购了，其实他们是一家，不过是不同的品牌~大同小异吧，关键看细胞长得好坏~~
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8楼2014-02-17 15:21:07
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玻璃微球

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 落落_无尘 at 2014-02-17 14:14:39
您的意思是说买来就先复苏再冻存一批吗？这段过程用什么培养基呢？主要是怕买了细胞养不好的话耽误事...

用寄来的培养基冻啦~ 其实用全血清冻也可以，全血清+百分之十的DMSO，一定要用好的血清~影响挺大的
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9楼2014-02-17 16:58:21
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain
买一点，先大量扩增保种。
然后逐渐掺入你们的培养基，慢慢的将ATCC的替换为你们自己的，这样保险
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我的路靠我的脚踩出来！！！不走寻常路！！！
10楼2014-02-17 22:40:11
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