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三蛰

铜虫 (小有名气)

[求助] 来来来,小白我有构建表达载体的问题请教! 已有4人参与

各位大侠,我在构建一个酵母BY4741的附加型表达载体,有一个很初级的问题,就是启动子是特异的还是随便的启动自都行?要求不高,载体能够在酵母中高效表达目的基因即可。。。
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我不会!
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baihaer

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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三蛰: 金币+1, 有帮助, 谢谢回帖 2014-02-12 11:26:57
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-02-12 13:39:17
启动子不用非特异的,一般的ATG就行,如果你怕基因表达效率低可以在ATG前面加一个KOZAK区域来增强翻译起始位点识别性,如GCCGCCACC+ATG
没有SB的事,只有SB的人
2楼2014-02-12 11:18:03
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三蛰

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by baihaer at 2014-02-12 11:18:03
启动子不用非特异的,一般的ATG就行,如果你怕基因表达效率低可以在ATG前面加一个KOZAK区域来增强翻译起始位点识别性,如GCCGCCACC+ATG

。。。起始密码子ATG。。。和启动子promotor。。。是一回事吗。。。。
我不会!
3楼2014-02-12 11:26:34
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
三蛰: 金币+5, 有帮助 2014-02-12 14:13:35
引用回帖:
3楼: Originally posted by 三蛰 at 2014-02-12 11:26:34
。。。起始密码子ATG。。。和启动子promotor。。。是一回事吗。。。。...

起始密码子和启动子当然不是一回事了。
如果你没有特别的要求,把目标基因克隆岛酵母工程表达载体里就可以了。
4楼2014-02-12 11:41:10
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huangrui1988

铜虫 (小有名气)


【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
三蛰: 金币+5, 有帮助 2014-02-12 14:13:43
启动子是木有特异性这一说法的,除非你的基因里面还有顺式元件就另说,但是一般是没有的,所以忽略吧。
5楼2014-02-12 12:33:44
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
启动子没有特殊要求,一般就可以除非你做诱导表达,选用诱导表达启动子。
hehe
6楼2014-02-12 20:46:10
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