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farther1990

铜虫 (初入文坛)

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[求助] 求助如何将蛋白和游离荧光配体分离已有2人参与

用荧光配体标记蛋白，现在想要将溶于去污剂溶液的蛋白和荧光配体分离开来，请问使用哪种简便便宜的分离或过滤方式能达到这种效果？跪求

，万分感谢各位的帮助与关注！

[ Last edited by farther1990 on 2014-2-12 at 10:23 ]

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不以物喜，不以己悲

1楼 2014-02-12 09:47:58

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farther1990

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10楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2014-02-14 00:05:56
除去过量小分子除了离子交换柱就是透析,要么然HPLC或者ziptip之类的吸附材料. 你可以用些小点的离子交换柱嘛,比如这种:http://www.genaxxon.net/pdf/CentriSep.pdf 只有0.5ml体积, 就在2ml EP管里做. 10分钟就完成 ...

我的药物和受体结合是非共价结合呢。那这些方法不适用啊，好心酸啊

不以物喜，不以己悲

12楼2014-02-14 09:50:18

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wangdunzju

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【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-02-12 13:40:45

如果配体和蛋白的分子量差距大的话，可以考虑用凝胶电泳分离，然后切胶回收。

2楼2014-02-12 10:29:56

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farther1990

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2楼: Originally posted by wangdunzju at 2014-02-12 10:29:56
如果配体和蛋白的分子量差距大的话，可以考虑用凝胶电泳分离，然后切胶回收。

非常感谢！因为我想测定游离的荧光配体浓度，如果是跑胶的话就不能达到这个效果。我尝试使用过10kD超滤的方法，也不能将游离配体完全离心收集。

不以物喜，不以己悲

3楼2014-02-12 10:35:41

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wangdunzju

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【答案】应助回帖

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kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-02-13 12:26:37

如果你的目的只是测荧光配体的浓度，查查看是不是有检测荧光信号的方法，直接检测样品中荧光物质的浓度，然后换算成配体的浓度。仅供参考。

4楼2014-02-12 15:15:12

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