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zdfang83木虫 (正式写手)
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请问GST pull-down可以钓取细胞裂解物中的脂质吗？
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最近对细胞膜的表面受体非常感兴趣，所以在看GST pull-down技术，想深入了解一下，就想到了下面这一连串的问题。 第一，如题，GST pull-down可以钓取细胞裂解物中的脂质吗？因为文献中介绍蛋白质-脂质互作方法中有一种脂质亲和法和GST pull-down的原理一致，只不过是反过来了，把脂质与琼脂糖树脂取代了GST融合蛋白与琼脂糖树脂结合而已，既然如此，那就应该是可行的吧? 第二，细胞裂解物中的蛋白有亲水的也有疏水的，那么都能钓取出来吗？怎么样的反应条件才能保证无论目的蛋白是亲水的还是疏水的都能与诱饵蛋白结合？ 第三，细胞的表面受体一定是蛋白吗？我看文献中有的蛋白的受体是鞘磷脂呢？细胞膜成分挺复杂的，如果受体是脂质，或者说如果与诱饵蛋白互作的是脂质，那么什么样的条件下被诱饵蛋白钓出来的可能性才能最大？怎么样裂解细胞才能保证无论与诱饵蛋白互作的是亲水的蛋白还是疏水蛋白亦或者是脂质都能保存下来且有最大的机会与诱饵蛋白互作？ 才初步了解这个技术，希望有经验或者了解较多的人能够指点一下，也可以私信交流。  |
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