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[交流]
交流毒素在细胞膜受体的钓选
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实验思路：现制备有杀虫蛋白A，想探究其对昆虫中肠细胞的毒杀机制，依据苏云金芽胞杆菌的抗虫作用，猜想杀虫蛋白A借助昆虫中肠细胞膜的特异受体，通过信号传导或转入细胞后修饰等进入细胞，发挥毒力。借助蛋白-蛋白之间的相互作用寻找目的蛋白的受体，亦或其它方法证明蛋白之间的相互作用并找到对应的受体分子。 瓶颈有：1.大量收集细胞后，提取细胞膜需要保证细胞膜的蛋白完整。 2.采用免疫共沉淀钓取受体，输入输出要如何设置才能保证实验数据可靠。 目前我已经做过IP和pulldown，效果都不好。 如果大家有更好的思路或者具体的文献方法指导，感激不尽 [ Last edited by silicare on 2014-2-18 at 08:15 ] |
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