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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 质量控制 » 梯度洗脱溶剂峰问题
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wangna029.

木虫 (小有名气)

[交流] 梯度洗脱溶剂峰问题 已有16人参与

最近做实验时，流动相A为磷酸盐（pH4.0）:乙腈=9:1
                              流动相B为乙腈：水=9:1
溶剂为乙腈，波长220nm,溶剂峰很多很杂，严重干扰测定，仪器冲洗过、色谱柱也冲洗得很彻底，换了254nm的波长，但溶剂峰还是很多，到底是什么原因呢？如何解决啊
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1楼 2014-01-23 14:36:51
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user53900

木虫 (正式写手)

知易行难，实验的真谛
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
星海慧儿: 金币+3, 多谢回帖交流 2014-02-01 09:33:04
有杂质峰无外乎两个方面，机器和流动相引入，机器的话像楼上所说的，彻底把机器给清洗，然后先别用磷酸盐之类的，只用乙腈-水梯度走一下空白，看看结果，若是这样都还是有杂质峰的话，那应该就是乙腈和水的问题了，然后把乙腈和水在排除一下，这样就解决一半。等基线平了，再配置磷酸盐流动相，若是有杂质，换另外厂家的磷酸盐，知道可以接受为止。你这样怀疑这怀疑那的，没有的章程，浪费时间，还容易被老板批，一步步的想想，按部就班的来，我相信你一定能够解决的
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我们已经走的太远，以至于忘了为什么而出发
23楼2014-01-26 16:16:43
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laiyin_111

木虫 (正式写手)

梦想家
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我也楼主一样，也遇到了相同的情况。我也是磷酸盐和乙腈，220nm的波长，也做过各种不同的尝试。论坛里查看了很多相关帖，怀疑是水的问题，需要用到MILLIPORE的去离子水可能会好一些。我现在还在不断尝试中，没有解决这个问题，期待能和楼主共同解决。
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想想现在，有事可做，即是幸福~
2楼2014-01-23 15:12:14
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shenyangxjl

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
zhychen2008: 金币+1, 多谢回帖交流 2014-01-25 21:38:23
先把盐过滤后与乙腈混合，之后不过滤，只超声，先把水过滤后与乙腈混合，之后超声，也就是水相单独过滤，有机相不过滤，试试
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追求的脚步永不停歇
3楼2014-01-23 16:22:32
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顾莫柔

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
不建议水过滤后与已经混合，产生大量气泡不说，国产乙腈使用前也是需要过滤的。
此问题怀疑是进样口污染，清洗一下试试。
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矫情的不是我是生活，残忍的不是我是很多。
4楼2014-01-23 18:10:47
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