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铜虫 (小有名气)

[求助] 拟胚体在无lif培养基中培养问题

请问各位前辈,先做拟胚体培养,培养2天后,拟胚体竟然贴壁了。请各位前辈,我的protocol如下,帮忙分析一下。

1、正常消化的IPS细胞,制备成单细胞悬液。
2、接种于玻璃培养瓶,无lif的KSR培养基中。
3、接种半小时后,晃动培养瓶防止贴壁。
4、培养1天后,发现有很多拟胚体形态形成。
5、第二天观察时,几乎全部的拟胚体均已贴壁,并且部分的拟胚体疑似有分化迹象。
6、我之前也做过几次的拟胚体培养,效果较好,但是接种的细胞浓度比这次的小一倍。
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