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rzhdw

铜虫 (小有名气)

[求助] Live/Dead Baclight Bacterial Viability Kit 显微镜看活菌/死菌,细菌乱动无法照相 已有4人参与

如题,应该是细菌随着玻片上的液体移动。我用5ul染色菌液,18mm*18mm盖玻片压片。尝试将压片体积从1ul改变到10ul,结果都一样动的厉害,拍出来的照片基本上就是一条细菌运动轨迹。。。有没有做这个的同学,交流一下吧
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xielisherry

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

最近也在做live/dead 染色,但是所有菌既被染成了红色又被染成了绿色,请问有谁知道是怎么回事?有哪位有经验的大神能给个染色步骤教程什么的么,万分感谢
13楼2014-05-27 11:27:05
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rzhdw

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by skull123 at 2014-01-17 23:18:28
有这样子么?直接点菌液在载玻片上,用酒精灯火微微烘烤干,再染色,再拍照不好么?

多谢回复!我用的染料是跟细胞膜通透性有关的,细胞膜完整的细菌只能通过绿色染料被染成绿色,而细胞膜损坏的细菌则可以通透红色染料呈现红色。如果用酒精灯烤干的话恐怕细胞膜早就坏掉了。。。
5楼2014-01-19 11:55:40
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普通回帖

skull123

木虫 (正式写手)

有这样子么?直接点菌液在载玻片上,用酒精灯火微微烘烤干,再染色,再拍照不好么?
2楼2014-01-17 23:18:28
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skull123

木虫 (正式写手)

而且如果要观看细菌,肯定要用到油镜,如果里面是液体,而且有盖玻片,油镜肯定会压迫盖玻片,导致中心发生形变,液体向四周扩散
3楼2014-01-17 23:20:48
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定军山貔貅

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by skull123 at 2014-01-17 23:20:48
而且如果要观看细菌,肯定要用到油镜,如果里面是液体,而且有盖玻片,油镜肯定会压迫盖玻片,导致中心发生形变,液体向四周扩散

可以用吸水纸吸干多余水,这样盖片就不会乱动了

[ 发自小木虫客户端 ]
越努力越幸运
4楼2014-01-18 01:11:51
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rzhdw

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by skull123 at 2014-01-17 23:20:48
而且如果要观看细菌,肯定要用到油镜,如果里面是液体,而且有盖玻片,油镜肯定会压迫盖玻片,导致中心发生形变,液体向四周扩散

多谢你的回复!我没有用油镜,用的是Leica的荧光显微镜,40x物镜,可能因为是荧光,所以相对灵敏一些,从目镜可以清晰看到细菌的荧光,但就是动的太厉害,无法拍照
6楼2014-01-19 11:57:51
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rzhdw

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 定军山貔貅 at 2014-01-18 01:11:51
可以用吸水纸吸干多余水,这样盖片就不会乱动了
...

多谢!可是我只加了5ul菌液压片,液体并没有溢出盖玻片。而且也尝试了更少菌液压片,都不行。。。好纠结
7楼2014-01-19 11:59:51
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skull123

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by rzhdw at 2014-01-19 11:55:40
多谢回复!我用的染料是跟细胞膜通透性有关的,细胞膜完整的细菌只能通过绿色染料被染成绿色,而细胞膜损坏的细菌则可以通透红色染料呈现红色。如果用酒精灯烤干的话恐怕细胞膜早就坏掉了。。。...

先染色,在固定,在拍照?
8楼2014-01-19 14:58:09
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skull123

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by rzhdw at 2014-01-19 11:55:40
多谢回复!我用的染料是跟细胞膜通透性有关的,细胞膜完整的细菌只能通过绿色染料被染成绿色,而细胞膜损坏的细菌则可以通透红色染料呈现红色。如果用酒精灯烤干的话恐怕细胞膜早就坏掉了。。。...

先等一段时间,等一段时间细菌染色后,该成绿色的是绿色,该成红色的成红色了,再热固定了拍照?这样不成吗?
9楼2014-01-19 15:00:54
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rzhdw

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by skull123 at 2014-01-19 15:00:54
先等一段时间,等一段时间细菌染色后,该成绿色的是绿色,该成红色的成红色了,再热固定了拍照?这样不成吗?...

热固定的话所有的菌都会变成红色了。。。为啥看别人文章上的图拍的那么清楚呢。。。
10楼2014-01-19 20:49:18
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