24小时热门版块排行榜    

查看: 3465  |  回复: 19

rzhdw

铜虫 (小有名气)

[求助] Live/Dead Baclight Bacterial Viability Kit 显微镜看活菌/死菌,细菌乱动无法照相 已有4人参与

如题,应该是细菌随着玻片上的液体移动。我用5ul染色菌液,18mm*18mm盖玻片压片。尝试将压片体积从1ul改变到10ul,结果都一样动的厉害,拍出来的照片基本上就是一条细菌运动轨迹。。。有没有做这个的同学,交流一下吧
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

xielisherry

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

最近也在做live/dead 染色,但是所有菌既被染成了红色又被染成了绿色,请问有谁知道是怎么回事?有哪位有经验的大神能给个染色步骤教程什么的么,万分感谢
13楼2014-05-27 11:27:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rzhdw

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by skull123 at 2014-01-17 23:18:28
有这样子么?直接点菌液在载玻片上,用酒精灯火微微烘烤干,再染色,再拍照不好么?

多谢回复!我用的染料是跟细胞膜通透性有关的,细胞膜完整的细菌只能通过绿色染料被染成绿色,而细胞膜损坏的细菌则可以通透红色染料呈现红色。如果用酒精灯烤干的话恐怕细胞膜早就坏掉了。。。
5楼2014-01-19 11:55:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

skull123

木虫 (正式写手)

有这样子么?直接点菌液在载玻片上,用酒精灯火微微烘烤干,再染色,再拍照不好么?
2楼2014-01-17 23:18:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

skull123

木虫 (正式写手)

而且如果要观看细菌,肯定要用到油镜,如果里面是液体,而且有盖玻片,油镜肯定会压迫盖玻片,导致中心发生形变,液体向四周扩散
3楼2014-01-17 23:20:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

定军山貔貅

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by skull123 at 2014-01-17 23:20:48
而且如果要观看细菌,肯定要用到油镜,如果里面是液体,而且有盖玻片,油镜肯定会压迫盖玻片,导致中心发生形变,液体向四周扩散

可以用吸水纸吸干多余水,这样盖片就不会乱动了

[ 发自小木虫客户端 ]
越努力越幸运
4楼2014-01-18 01:11:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rzhdw

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by skull123 at 2014-01-17 23:20:48
而且如果要观看细菌,肯定要用到油镜,如果里面是液体,而且有盖玻片,油镜肯定会压迫盖玻片,导致中心发生形变,液体向四周扩散

多谢你的回复!我没有用油镜,用的是Leica的荧光显微镜,40x物镜,可能因为是荧光,所以相对灵敏一些,从目镜可以清晰看到细菌的荧光,但就是动的太厉害,无法拍照
6楼2014-01-19 11:57:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rzhdw

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 定军山貔貅 at 2014-01-18 01:11:51
可以用吸水纸吸干多余水,这样盖片就不会乱动了
...

多谢!可是我只加了5ul菌液压片,液体并没有溢出盖玻片。而且也尝试了更少菌液压片,都不行。。。好纠结
7楼2014-01-19 11:59:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

skull123

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by rzhdw at 2014-01-19 11:55:40
多谢回复!我用的染料是跟细胞膜通透性有关的,细胞膜完整的细菌只能通过绿色染料被染成绿色,而细胞膜损坏的细菌则可以通透红色染料呈现红色。如果用酒精灯烤干的话恐怕细胞膜早就坏掉了。。。...

先染色,在固定,在拍照?
8楼2014-01-19 14:58:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

skull123

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by rzhdw at 2014-01-19 11:55:40
多谢回复!我用的染料是跟细胞膜通透性有关的,细胞膜完整的细菌只能通过绿色染料被染成绿色,而细胞膜损坏的细菌则可以通透红色染料呈现红色。如果用酒精灯烤干的话恐怕细胞膜早就坏掉了。。。...

先等一段时间,等一段时间细菌染色后,该成绿色的是绿色,该成红色的成红色了,再热固定了拍照?这样不成吗?
9楼2014-01-19 15:00:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rzhdw

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by skull123 at 2014-01-19 15:00:54
先等一段时间,等一段时间细菌染色后,该成绿色的是绿色,该成红色的成红色了,再热固定了拍照?这样不成吗?...

热固定的话所有的菌都会变成红色了。。。为啥看别人文章上的图拍的那么清楚呢。。。
10楼2014-01-19 20:49:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 rzhdw 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 4/200 2026-08-08 08:27 by 6vVgjDL4CnGu
[基金申请] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 KXLV3nuBVBY7 2026-08-07 4/200 2026-08-08 08:21 by 6vVgjDL4CnGu
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 3/150 2026-08-08 03:47 by 6vVgjDL4CnGu
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +3 布布和一二 2026-08-07 3/150 2026-08-07 15:09 by gltch
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[论文投稿] 十年后又回来了,论文投稿求助 +4 哈哈114477 2026-08-01 4/200 2026-08-07 14:39 by jgy194592
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +4 yang182083 2026-08-06 6/300 2026-08-07 12:43 by 虫友是什么虫
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[基金申请] 有没有H口的?有收到消息的吗? +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[基金申请] 纯娱乐,不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
[基金申请] 面上提前没消息,有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 18/900 2026-08-04 14:42 by archvillain
[基金申请] 什么时候能放榜呀? +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
请填处理意见